酵素処理、細胞外マトリックスおよび細胞成長因子が培養ヒト毛乳頭細胞に与える影響

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抄録

ヒト頭皮毛包由来毛乳頭細胞(DPC)の単離および継代培養に際し,酵素処理,細胞外マトリックスのコーティングが毛乳頭細胞増殖に与える影響を検討した.単離毛乳頭の酵素処理では,コラゲナーゼ処理群は未処理群と比較して培養皿への接着・シート形成ともに良好であった.しかし,ヒアルロニダーゼおよびディスパーゼ処理では未処理群よりシート形成において良好な結果は得られなかった.DPCの培養時に細胞外マトリックスで培養皿をコーティングすると未コーティングで培養したDPCに比べ有意に増殖を促進した.特にファイブロネクチンでコーティングした培養皿で培養したDPCは最も良好な増殖促進作用を示した.以上の如く,より長期に多量のDPCの培養が可能な方法を確立した.次に,各種細胞成長因子添加によるDPC増殖能の検討を行った.EGF,TGF-α,acidic-FGF,KGFは,統計学的に有意に細胞数の増加を認め,TGF-β1は有意に抑制した.しかし,促進作用を示した2種類の成長因子を同時に添加してもDPC増殖に対する,相乗作用は認めなかった.さらに、現在発毛促進剤として知られるminoxidilおよびその代謝産物であるminoxidil sulfateを添加し,DPC増殖に対する作用を検討したが,両者ともDPC増殖を促進せず,逆に,濃度依存性に抑制した.以上の如く,本法はDPCに与える種々の因子の検討が可能である.

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