ブタ卵子第2減数分裂中期への減数分裂進行時において卵子卵丘細胞間のギャップジャンクションの閉鎖により卵子内CAMP量は低下する The Drop in the cAMP Level Due to the Closure of Gap Junctional Communication Between Cumulus Cells and Oocytes is Essential for Meiotic Progression Beyond the MI Stage in Porcine Oocytes

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抄録

哺乳動物の卵子は多層の卵丘細胞に覆われている.卵丘細胞と卵子間のギャップジャンクションが閉鎖すると卵子は第2減数分裂中期へと減数分裂を進行する.このギャップジャンクションの閉鎖にはギャップジャンクション構成因子であるConnexin-43のリン酸化が関与している.そこで本研究では,卵丘細胞のConnexin-43のリン酸化の卵子のcAMP量,MAP kinase活性,核相の進行に対する影響について検討した.24時間培養したCOCsにおける卵丘細胞のConnexin-43は脱リン酸型が多く存在したが,培養32時間以降の卵丘細胞ではリン酸型のバンドが著しく濃くなった.次に,24時間培養したCOCsをPI 3-kinase抑制剤(LY294002)あるいはPKC抑制剤(Calphostin C)を添加した培地でさらに24時間培養し,Connexin-43のリン酸化を抑制した.その結果,これらの卵子はcAMP量の有意な増加とMAP kinase活性の著しい低下,第一減数分裂中期での減数分裂停止が観察された.以上の結果から,ブタ卵子の第一減数分裂中期以降への減数分裂進行時において,卵丘細胞卵子間のギャップ結合が閉鎖すると卵丘細胞から卵子へ移行するcAMP量が減少し,卵子内のcAMP量が低下する結果,MAP kinaseが活性化し第2減数分裂中期へと減数分裂が進行することが推察された.

Mammalian oocytes are surrounded by numerous layers of cumulus cells and the loss of gap junctional communication between cumulus cells and oocytes induces meiotic progression to the MII stage in oocytes. The closure of gap junctional communication was associated with the phosphorylation of connexin-43, gap junctional protein, in cumulus cells. In this study we investigated the effects of the phosphorylation of connexin-43 in cumulus cells on the cAMP level, MAP kinase activity and meiotic progression beyond the MI stage in the oocytes. The connexin-43 in cumulus cells was phosphorylated after 32-hr cultivation of COCs and up to 48 hr, whereas most of the connexin-43 was unphosphorylated in cumulus cells from COCs cultured for 24 hr. When the phosphorylation of connexin-43 in cumulus cells was suppressed by the addition of either PI 3-kinase inhibitor or PKC inhibitor, a significantly higher level of cAMP in the oocyte and a significantly lower proportion of oocytes at the MII stage were produced, as compared to those of oocytes cultured for 48 hr without these drugs. The activity of MAP kinase was also significantly inhibited by the addition of both drugs. It was therefore concluded that the closing of the gap junctional communication via the phosphorylation of connexin-43 might induce a decrease in the cAMP level, resulting in activation of MAP kinase and meiotic progression beyond the MI stage to the MII stage in porcine oocytes.

収録刊行物

  • Journal of mammalian ova research = 日本哺乳動物卵子学会誌

    Journal of mammalian ova research = 日本哺乳動物卵子学会誌 18(3), 99-105, 2001-10-01

    日本哺乳動物卵子学会

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各種コード

  • NII論文ID(NAID)
    10008024471
  • NII書誌ID(NCID)
    AN10548943
  • 本文言語コード
    ENG
  • 資料種別
    ART
  • ISSN
    13417738
  • NDL 記事登録ID
    5982036
  • NDL 雑誌分類
    ZR4(科学技術--生物学--動物)
  • NDL 請求記号
    Z18-1673
  • データ提供元
    CJP書誌  NDL  IR  J-STAGE 
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