Irpex lacteus由来セロビオースデヒドロゲナーゼの精製と性質およびセルロースに対する吸着 Purification and Characterization of Cellobiose Dehydrogenase from Irpex lacteus and Its Adsorption on Cellulose

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著者

    • Hai Pham Quy QuyHAI Pham
    • 信州大学工学部物質工学科 Department of Chemistry and Material Engineering, Faculty of Engineering, Shinshu University
    • 野崎 功 NOZAKI Kouichi
    • 信州大学工学部物質工学科 Department of Chemistry and Material Engineering, Faculty of Engineering, Shinshu University
    • 神田 鷹久 KANDA Takahisa
    • 信州大学工学部物質工学科 Department of Chemistry and Material Engineering, Faculty of Engineering, Shinshu University

抄録

 白色腐朽菌であるIrpex lacteusは,電子受容体に対して異なる特異性を示す二つのセロビオース脱水素酵素(CDHI,CDHII)を生産する.その中でも主要成分と考えられるCDHII を単一に精製し性質を調べた.CDHIIはヘムフラボタンパク質であり,SDSPAGEで97kDaの分子量であった.また,本酵素はグルコースとして7.2%の糖含量を持つ糖タンパク質であることがわかった.本酵素の基質特異性,最適温度および温度安定性,Phanerochaete chrysosporium由来のCDHに類似していたが,pH安定性は3から5までの間であり,とくにアルカリ性側での安定性は他菌のCDHに比べて低かった.また,最適基質および電子受容体であるセロビオースとチトクロムcに対するkcat/Km値は,おのおの429.4mM<SUP>-1</SUP>s<SUP>-1</SUP>と4405mM<SUP>-1</SUP>s<SUP>-1</SUP>であった.セルロースに対する等温吸着に関する研究から,本酵素の吸着はone-binding siteメカニズムに従っていることが予想された.また,本酵素の基質への吸着における親和性は,アモルファスセルロースより結晶性セルロースに対して高く,逆に吸着量は,アモルファスセルロースに対して高い結果が得られた.

White-rot fungus Irpex lacteus produces two cellobiose dehydrogenases (CDH I and CDH II) which have different electron acceptor specificity. CDH II which is a major CDH produced by I. lacteus was purified about 262 times to homogeneity and characterized. CDH II was a hemoflavo protein with the molecular mass of 97 kDa on SDS-PAGE, and it was a glycoprotein with carbohydrate content of 7.2% as glucose. Optimum temperature, heat stability as well as substrate specificity of this enzyme were similar to CDH from Phanerochaete chrysosporium. However, the stable pH range of CDH II was pH 3 to 5, which was different from other CDHs reported (pH 4 to 10). Cellobiose and cytochrome c were the best substrate and electron acceptor with kcat/Km values of 429.4- and 4405 mM-1s-1, respectively. From the studies on adsorption isotherm of this enzyme on cellulose, the one-binding site mechanism was suggested. Moreover, CDH II had higher adsorption affinity but lower adsorption capacity on crystalline cellulose than on amorphous one.

収録刊行物

  • 応用糖質科学 : oyo toshitsu kagaku = Journal of applied glycoscience

    応用糖質科学 : oyo toshitsu kagaku = Journal of applied glycoscience 47(3), 311-318, 2000-08-31

    日本応用糖質科学会

参考文献:  30件中 1-30件 を表示

被引用文献:  2件中 1-2件 を表示

各種コード

  • NII論文ID(NAID)
    10008252132
  • NII書誌ID(NCID)
    AN10453916
  • 本文言語コード
    ENG
  • 資料種別
    ART
  • ISSN
    13403494
  • NDL 記事登録ID
    5521416
  • NDL 雑誌分類
    ZP24(科学技術--化学・化学工業--糖・澱粉)
  • NDL 請求記号
    Z17-15
  • データ提供元
    CJP書誌  CJP引用  NDL  IR  J-STAGE 
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