硫黄酸化細菌の細胞下におけるsulfitedehy drogenase触媒反応の酵素学的解析 Kinetic Study of the Sulfite Dehydrogenase-catalyzed Reaction in the Subcellular State of Thiobacillus thiooxidans

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抄録

 Thiobacillus thiooxidansをセンサーに用いた亜硫酸高感度自動測定装置について,本研究では,菌体ではなく細胞下(subcellular)画分におけるsulfite dehydrogenase反応の酵素学的な基盤確認を行おうとした.その結果,反応初速度は画分(酵素)の量に比例することが確認され,至適pHは7.5であった.亜硫酸を基質とする触媒反応の速度論量は,Michaelis定数Km1.7±0.2mM,および最大速度V0.083±0.035mM/min/mgであった.第二基質のフェリシアン化カリウム(K3Fe(CN)6)濃度は0-1.5mMの範囲で初速度に比例した.また,K3Fe(CN)6をチトクロームcに置き換えて触媒反応を観測したところ,第二基質となることが確認された.これらの結果から,菌体自体と同様あるいはそれ以上に,細胞下画分sulfite dehydrogenaseを亜硫酸高感度測定装置のセンサーとして活用できると考えられた.

Based on kinetic studies of the sulfite dehydrogenase-catalyzed reaction investigated using the subcellular fraction instead of the microbe Thiobacillus thiooxidans, it was confirmed that the initial velocity is very proportional on the concentration of the subcellular fraction and the optimal pH is 7.5, which is the same as that obtained in the microbe. The kinetic parameters, Michaelis constant (Km) and maximum velocity (V), were evaluated to be 1.7±0.2 mM and 0.083±0.035 mM/min/mg protein, respectively. The ferricyanide concentration examined was found to be proportional to the initial velocity within 1.5 mM. It was also found that cytochrome c can be absorbed as a second substrate in place of ferricyanide. Thus, a new device should be very possible using the subcellular fraction of T. thiooxidans as a highly sensitive and automatic sensor apparatus for sulfite etermination.

収録刊行物

  • 応用糖質科学 : oyo toshitsu kagaku = Journal of applied glycoscience

    応用糖質科学 : oyo toshitsu kagaku = Journal of applied glycoscience 48(1), 11-17, 2001-01-01

    日本応用糖質科学会

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各種コード

  • NII論文ID(NAID)
    10008252277
  • NII書誌ID(NCID)
    AN10453916
  • 本文言語コード
    ENG
  • 資料種別
    ART
  • ISSN
    13403494
  • NDL 記事登録ID
    5648073
  • NDL 雑誌分類
    ZP24(科学技術--化学・化学工業--糖・澱粉)
  • NDL 請求記号
    Z17-15
  • データ提供元
    CJP書誌  NDL  IR  J-STAGE 
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