野ネズミ等の Rickettsia tsutsugamushi保有調査におけるポリメラーゼ連鎖反応法の応用 The Use of Polymerase Chain Reaction Mrthod for the Detection of Rickettsia tsutsugamushi in Wild Rodents

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著者

    • 藤井 理津志 FUJII Ritsushi
    • 岡山県環境保健センター微生物科 Department of Microbiology, Okayama Prefectural Institute for Environmental Science and Public Health
    • 濱野 雅子 HAMANO Masako
    • 岡山県環境保健センター微生物科 Department of Microbiology, Okayama Prefectural Institute for Environmental Science and Public Health
    • 森 忠繁 MORI Tadashige
    • 岡山県環境保健センター微生物科 Department of Microbiology, Okayama Prefectural Institute for Environmental Science and Public Health

抄録

野ネズミ等の<I>Ricrettsia tsutsugamushi</I>保有調査に, ポリメラーゼ連鎖反応法 (PCR法) が応用可能か検討した.<BR><I>R.tsutsugamushi</I>の群共通抗原をコードする遺伝子をターゲットとしたPCR法を本試験に用いた. PCR法は標準株 (Karp株, Kato株及びGilliam株) 及び組織培養馴化野外分離株 (KN-1株及びGJ-1株) のいずれをも検出でき, その検出限界はリケッチア粒子1.3個であった.また, 野外分離リケッチア株を12頭のマウスに実験感染させ, 経時的にPCR法による検出を行ったところ, 4カ月経過後でも2頭中1頭からリケッチアDNAが検出できた.<BR>さらに岡山県内5カ所で55頭の野ネズミ等を捕獲し, PCR法による<I>R.tsutsugamushi</I> DNAの検出と, マウス接種法 (MI法) によるリケッチア分離を同時に行った.その結果, MI法でリケッチアが分離された13頭中12頭から, 分離されなかった42頭中10頭からPCR法でリケッチアDNAが検出され, 本法が野ネズミ等の<I>R.tsutsugamushi</I>保有調査に応用できることがわかった.またPCR法の検出結果から, 岡山県中部が他の地域に比べ, 高率 (44~81%) にリケッチアの汚染を受けていることが明らかとなった.

We studied the applicability of polymerase chain reaction (PCR) method for the detection of <I>R. tsutsugamushi</I> in wild rodents. The PCR method which amplified the gene coding for the group-specific antigen of <I>R. tsutsugamushi</I> was used in this study. Specific PCR products (88 bp) were obtained with the DNAs from three reference strains (Gilliam, Karp, and Kato) and two cell culture adapted field isolates (KN-1 and GJ-1). The minimum number detectable by the PCR method was estimated to be 1.3 copies of rickettsial genome. In a study with experimentally infected mice, the PCR method could detect rickettsial DNA in one of two infected mice at four months after inoculation. Thereafter, fifty five wild rodents were captured in five areas of Okayama Prefecture, and <I>R. tsutsugamushi</I> DNA was detected, by the PCR method, by amplifying DNA from the spleen of each rodent. The rickettsia was also isolated from the same rodents by the mouse inoculation method. By the PCR method, rickettsial DNAs could be detected in 12 of 13 rodents from which the rickettsiae were isolated, and in 10 of 42 rodents from which no rickettsiae were isolated. These findings indicate that the PCR method is a simple and specific procedure to detect <I>R. tsutsugamushi</I> in wild rodents. On the other hand, the results of the PCR method demonstrated that the middle area of Okayama Prefecture was highly (44-81%) contaminated with <I>R. tsutsugamushi</I>.

収録刊行物

  • 感染症学雑誌 : 日本伝染病学会機関誌 : the journal of the Japanese Association for Infectious Diseases

    感染症学雑誌 : 日本伝染病学会機関誌 : the journal of the Japanese Association for Infectious Diseases 69(10), 1103-1109, 1995-10-20

    The Japanese Association for Infectious Diseases

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各種コード

  • NII論文ID(NAID)
    10008727229
  • NII書誌ID(NCID)
    AN00047715
  • 本文言語コード
    JPN
  • 資料種別
    ART
  • ISSN
    03875911
  • NDL 記事登録ID
    3644801
  • NDL 刊行物分類
    SC191;SC221
  • NDL 雑誌分類
    ZS9(科学技術--医学--病理学・微生物学・寄生虫学・感染・免疫学・血清学・アレルギー)
  • NDL 請求記号
    Z19-193
  • データ提供元
    CJP書誌  NDL  J-STAGE 
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