血友病Ａ患者に認められた２種のミスセンス変異（Ｒ２１５９Ｃ，Ｒ２２０９Ｑ）は変異第ＶＩＩＩ因子の分泌が阻害されている

• 山中　 晃

  東京医科大学臨床検査医学講座

• 天野 景裕

  東京医科大学臨床検査医学講座

• 永泉 圭子

  東京医科大学臨床検査医学講座

• 稲葉　 浩

  東京医科大学臨床検査医学講座

• 新井 盛夫

  東京医科大学臨床検査医学講座

• 福武 勝幸

  東京医科大学臨床検査医学講座

書誌事項

タイトル別名

• Recombinant Missense Mutant Factor VIII (R2159C, R2209Q) in Patients with Hemophilia A Exhibit Decreased Secretion of Abnormal Proteins

抄録

2症例の血友病A患者に認められた第VIII因子 (FVIII) Cドメイン内のミスセンス変異 (R2159C, R2209Q) のタンパク質発現実験を行い, 変異FVIIIの細胞内合成・分泌動態を検討した. 変異FVIII遺伝子を導入したプラスミドをCOS-1細胞にトランスフェクションし, 放射性同位元素 (35S-メチオニン) を用いたパルス-チェイス実験を行った. 標識FVIIIの免疫沈降の後, SDS-PAGE解析を行った. いずれの変異FVIIIも野性型と同様に細胞内で合成されたが, 4時間後には細胞から著減していた. しかし, 細胞培養液中への分泌は, R2209Qでは確認されず, R2159Cでは低下していた. R2159Cの細胞培養液中に蛋白分解酵素阻害剤 (ALLN) を添加したところ, 用量依存性に細胞内のR2159Cの蓄積は増加したが, 変異FVIIIの分泌は改善されなかった. この2症例の変異FVIIIは細胞内で合成されるが, 分泌は阻害され, 引き続き細胞内分解が生じていることが示唆され, これが血友病Aの発現型をもたらしていると考えられた.

収録刊行物

• 日本血栓止血学会誌

  日本血栓止血学会誌 13 (2), 175-182, 2002

  一般社団法人 日本血栓止血学会

キーワード

• hemophilia A
• recombinant factor VIII
• site-directed mutagenesis
• mutant factor VIII
• intracellular degradation

詳細情報

• CRID: 1390001204445014528
• NII論文ID: 10010930905
• NII書誌ID: AN10353762
• DOI: 10.2491/jjsth.13.175
• COI: 1:CAS:528:DC%2BD38XltVWhsbg%3D
• ISSN: 18808808
• ISSN: 09157441
• Web Site: https://search.jamas.or.jp/link/ui/2002243635
• 本文言語コード: ja
• データソース種別:
  • JaLC
  • Crossref
  • CiNii Articles
• 抄録ライセンスフラグ: 使用不可