マウス初期胚における一過性あるいは持続性 EGFP 遺伝子発現の二本鎖 RNA を用いた制御 Specific Inhibition of Transient and Stable EGFP Gene Expression by Double Stranded RNA Interference in Mouse Preimplantation Embryos

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抄録

二本鎖RNA(dsRNA)の利用による遺伝子特異的発現阻害法について、EGFP発現を指標としてマウス胚で検討を行った。マウス前核期卵の雄性前核に注入したEGFP発現ベクターによるEGFP蛍光発現はEGFP dsRNAの注入により有意に低下し、この減少は胚盤胞期胚まで認められた。EGFP遺伝子導入マウス前核期胚あるいは細胞質にdsRNAを注入しEGFP発現を観察したところ、両区ともにEGFP発現が有意に阻害され、細胞質注入によるEGFP発現阻害効果が前核注入によるものよりも効果的であった。EGFP dsRNAを注入された桑実胚においてEGFP mRNAの減少が確認された。以上のことから、初期胚においてもdsRNAによる特異的遺伝子発現阻害の有効性が示唆された。

Double stranded RNA (dsRNA) interference is a useful tool for interfering with gene function by promoting the sequence-dependent degradation of targeted mRNA in several organisms. In the present study, in order to confirm and improve the effect of dsRNA, we investigated an inhibitory effect of dsRNA on both transient and stable gene expression of enhanced green fluorescent protein (EGFP) in mouse preimplantation embryos. In the transient expression system, the rates of fluorescent embryos were significantly decreased by co-injection of EGFP dsRNA and EGFP expression vector fragment into the pronucleus of zygotes. In the stable expression system, EGFP expression in transgenic embryos was significantly decreased by injection of EGFP dsRNA into both the pronucleus and cytoplasm of zygotes, but, cytoplasmic injection caused a more significant EGFP inhibition than pronuclear injection. In quantitative PCR analysis, the expression of the EGFP gene was also inhibited by dsRNA injection, whereas the endogenous gene expression was not affected. These data suggest that dsRNA can inhibit the specific gene expression without affecting the development and expression of other genes.<br>

収録刊行物

  • Journal of mammalian ova research = 日本哺乳動物卵子学会誌

    Journal of mammalian ova research = 日本哺乳動物卵子学会誌 20(3), 99-105, 2003-10-01

    日本哺乳動物卵子学会

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各種コード

  • NII論文ID(NAID)
    10012455054
  • NII書誌ID(NCID)
    AN10548943
  • 本文言語コード
    ENG
  • 資料種別
    ART
  • ISSN
    13417738
  • データ提供元
    CJP書誌  IR  J-STAGE 
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