<原著>ヒアルロン酸結合タンパクを用いた膝関節液ヒアルロン酸の測定 <ORIGINAL PAPER>Measurement of Hyaluronan in Knee Synovial Fluid using Hyaluronic Acid Binding Protein

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抄録

ヒアルロン酸は変形性関節炎やリウマチ性関節炎患者の膝関節液中に高い値で検出される.それはまた,関節炎活性のマーカーとなっている.近年,ヒアルロン酸結合タンパク(HABP)を用いることによってヒアルロン酸の検出が行われている.しかしながら,HABPを用いた方法と今まで行われてきた方法との間でヒアルロン酸の値についての関係は明確になっていない.この研究の目的は変形性関節炎とリウマチ性関節炎患者の関節液に含まれるヒアルロン酸をHABPを用いたELISA法と電気泳動法によって比較することである.グリコサミノグリカンはDi ferranteの方法に準じて関節液からの抽出を行った.ヒアルロン酸は電気泳道法によってセルロースアセテート膜上で他のグリコサミノグリカンから分離したアルシアンブルーで染色した.ヒアルロン酸-染色結合体はデンシトメーターで分析評価した.それに対して,ヒアルロン酸のすべてはモノクローナル抗体と特定の酵素を組み合わせたELISA法によって測定を行った.ELISA法が電気泳動法よりもHAは高い値を示した.ELISA法では抽出サンプルが未抽出サンプルよりもHAは低い値を示した.電気泳動法による関節液ヒアルロン酸の値では変形性関節炎とリウマチ性関節炎のそれとは大差は見られなかった.HABPを用いたELISA法は試料の前処理を必要としないため,電気泳動法よりも簡単で多数サンプルの測定が可能であるという利点がある.ELISA法によるヒアルロン酸の検出の特徴は今までの方法で得られたヒアルロン酸の値よりも高いということを考慮すべきである.

A high level of hyaluronan has been found in knee synovial fluid from patients with osteoarthritis and rheumatoid arthritis, and has also been proposed as a marker of arthritis activity. Recently, hyaluronic acid binding protein (HABP) has been adopted for the detection of hyaluronan. However, the relationship between the hyaluronan levelin the HABP assay method and conventional assays remains to be elucidated. The purpose of this study was to compare the occuracy of the two assay methods, ELISA using HABP and electrophoresis in the detection of hyaluronan in synovial fluid obtained from patients with osteoarthritis and rheumatoid arthritis. Glycosaminoglycans were isolated from synovial fluid using the procedure described by Differante. Hyaluronan was separated from other glycosaminoglycans by electrophoresis on a cellulose acetate membrane and stained with alcian blue. Hyaluronan-dye binding complex was evaluated in a scanning densitometer. For comparison, an amount of hyaluronan was assayed using ELISA, with combination of monoclonal antibodies and spedific enzyme digestion. The level of hyaluronan obtained using ELISA method was higher than that obtained by the electrophoretic method. The amount of isolated hyaluronan was lower compared to the non-isolated one in the ELISA method. Using the electrophoretic method, there was no marked difference between the synovial fluid hyaluronan level in rheumatoid arthritis and that in osteoarthritis. ELISA method using HABP has the advantage that it is simple and can be used to treat more samples than electrophresis because it does not require the isolation of hyaluronan from the fluid samples. The ELISA method for hyaluronan detection best suited the purpose of this study although the level of hyaluronan was higher than that obtained using the conventional method.

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各種コード

  • NII論文ID(NAID)
    10021885653
  • NII書誌ID(NCID)
    AN00053070
  • 本文言語コード
    JPN
  • 資料種別
    ART
  • ISSN
    03850072
  • データ提供元
    CJP書誌  NII-ELS 
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