マイクロプレートを用いた雄シバヤギ血漿中5α-ジヒドロテストステロンの酵素免疫測定法

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  • Microtitre Plate Enzyme-immunoassay for Determination of 5α-Dihydrotestosterone in Shiba-goat Blood Plasma
  • マイクロ プレート オ モチイタ オス シバヤギ ケッショウ チュウ 5 アルファ ジヒドロテストステロン ノ コウソ メンエキ ソクテイホウ

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抄録

雄シバヤギ血漿中5α－ジヒドロテストステロン(5α－DHT）に関する酵素免疫測定法（EIA）について検討した。抗血清は抗5α－DHT－11α－Succinate－BSAを、酵素標識ホルモンには5α－DHT－11α－Succinate－peroxidase(5α－DHT－HRP)を用いた。抗血清は100000倍に希釈・使用が可能であった。また、抗血清にはテストステロンが30％交叉反応するため、Bond Ekut CN-Uを用いたカラムクロマトグラフィーによる精製を行い、被検血漿中の5α－DHTとテストステロンを分離・測定した。その結果、酢酸エチル：ベンゼン＝2：98の展開液を流したところ、1.00－4.25mlの範囲に5α－DHTが溶出された。添加回収試験において添加量0.1－1.0pgの各濃度での回収率は、平均100.45％±2.13となった。再現性試験における頸静脈血および精巣静脈血の測定内変動係数(n=6)は各々6.38％および5.94％となり、測定間変動係数は8.36％ならびに11.53％となった。以上の結果から、雄シバヤギの血漿中5α－DHT濃度を、本法を用いて測定することが可能であることを明らかにした。

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