二基質同時測定法によるアルカリホスファターゼに関する研究 : その3.IgG結合アルカリホスファターゼ

機関リポジトリ Web Site

書誌事項

タイトル別名
  • 2基質同時測定法によるアルカリホスファターゼに関する研究-3-IgG結合アルカリホスファターゼ
  • 2 キシツ ドウジ ソクテイホウ ニヨル アルカリ ホスファターゼ ニカンスル
  • Studies on Alkaline Phosphatase by Use of "Two Substrates-in-one Tube" Metohd : 3. Alkaline Phosphatase Bound to IgG
  • 原著

この論文をさがす

抄録

type:text

Alkaline phosphatase (Al-P)の電気泳動法は種々の支特体が使用されている。中でもセルロース・アセテート膜は使用における簡便性から日常検査法として広く利用されている。著者もTitan III-Iso(セルロース・アセテート)膜を使用し,pNPP/PMP比の測定を平行して実施してきたが,電気泳動上で小腸型Al-P isozymeが優位であることを示し,pMPP/PMP比はその存在を否定するデータに遭遇した。その矛盾を解明するため種々の検討を行なった。その結果,この現象は寒天ゲルを支特体とした場合は陰極寄りに易動し,小腸型とは明らかに区別できたことからセルロース・アセテート膜特有の現象であることが判明した。一方,pNPP/PMP比は小腸型Al-P isozymeに感度が高い特性を有していることから,小腸型以外の特異なisozymeの存在を想定しカラムゲル濾過を実施したところ,通常の肝(II)型より分子量がやや大きい分画が得られた。Al-Pの他のたんぱく質との複合体を想定し酵素-免疫電気泳動を実施したところ,このAl-PはIgG(λ)結合Al-Pであることが判明した。免疫グロブリン結合Al-Pについては他にも報告が見られるが,今回の例はセルロース・アセテート膜上では小腸型Al-P isozymeと区別がつかず,pNPP/PMP比とのデータのくい違いにより発見されたもので他に例がない。以上のことから二基質同時測定法によるpNPP/PMP比は小腸型Al-P isozymeの決定的な同定法となる確証が得られた。

Various supporting media are used for the determination of alkaline phosphatase (Al-P) isozyme in electrophoresis. Among them, cellulose acetate membrane is currently used in the routine laboratory study because it is simple to handle. The author has been using a Titan III-Iso (cellulose acetate) plate as a supporting medium concurrent with the determination of pNPP/PMP ratio as a supplement. Unsuspected data were obtained which suggested the existence of intestine-type Al-P isozyme by electrophoresis but not by the pNPP/PMP ratio. To explain the discrepancy, an investigation was carried out. It was subsequently found that this phenomenon occurred when CELLOGEL, one kind of cellulose acetate, was used as a supporting medium, but not with agar gel. Therefore, this phenomenon was peculiar to cellulose acetate membrane. Since the intestine-type of Al-P isozyme is detected sensitively by pNPP/PMP ratio, further study was conducted using column gel filtration to demonstrate another unusual isozyme suspected. As a result, a fraction which has a higher molecular weight relative to the ordinary liver-type II Al-P isozyme was found by gel filtration. This fraction contained Al-P bound to IgG (λ) when studied by enzyme-immunoelectro-phoresis expecting an Al-P bound to other proteins. Al-P bound to immunoglobulin has been reported by several investigators previously. However, there has been no report on a similar case showing the same migration as the intestine-type Al-P isozyme on cellulose acetate membrane. It was concluded that the pNPP/PMP ratio is one of the most useful tools for the identification of intestine-type Al-P isozyme.

収録刊行物

キーワード

詳細情報 詳細情報について

問題の指摘

ページトップへ