ヒト歯髄培養細胞におけるplasminによるcalcineurinを介したCOX-2発現

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  • Plasmin-induced Cyclooxygenase-2 Expression via Calcineurin Activation in Human Dental Pulp Cells

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抄録

 目的 : Plasminは細胞外基質成分の消化だけでなく前駆体MMPsの活性化にも関与し, 線維素溶解・炎症・組織修復にかかわる生理学的・病理学的にも重要なセリンプロテアーゼである. また近年, plasminは細胞膜上に存在するprotease activated receptors (PARs) を介して炎症シグナルを伝達する報告がある. 著者らはそれが歯髄炎の進行にも関与していると考え, ヒト歯髄培養細胞を用いて, plasminによるcalcineurinの活性化を介したCOX-2発現およびPGE2産生について検討した. <br> 材料と方法 : 抜去歯よりout growthした細胞をヒト歯髄培養細胞とし, 10% FCS添加α-MEMにて培養した. 培養上清中にplasmin (100nmol/l) を添加し, COX-2 mRNA発現量をRT-PCR法, COX-2タンパク質量および転写因子NFATの核内移行をWestern Blot法, 培養上清中に放出されたPGE2量をenzyme immunoassay kitにて検討した. <br> 結果 : Plasminの添加により時間依存的に培養上清中のPGE2量は増加した. また, plasminはCOX-2 mRNA発現量を時間依存的に促進し, その効果はcalcineurin阻害薬であるFK506で抑制された. Plasminの添加により核タンパク質画分中の転写因子NFATc1量が増加し, COX-2タンパク質発現量も増加したが, いずれもFK506で抑制された. PAR-1活性化剤であるSFLLRNでもほぼ同様の結果が得られた. <br> 結論 : PlasminはPAR-1を介してCOX-2, PGE2を産生することで歯髄炎の進行に関与する可能性があり, またその細胞内シグナル伝達経路においてcalcineurin/NFATc1経路が関与することが示唆された.

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