光化学系IIのquality control:熱ストレス下でのホウレンソウチラコイド膜のD1タンパク質分解に関与するFtsHプロテアーゼの精製
書誌事項
- タイトル別名
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- Quality control of Photosystem II: purification of the FtsH protease from spinach thylakoids involved in the degradation of the D1 protein under moderate heat stress
抄録
ホウレンソウチラコイド膜に熱ストレスを与えると光化学系IIの反応中心タンパク質D1が特異的に損傷を受け、23kDaのN末端断片と9kDaのC末端断片が生じる。これまでの研究から、熱ストレス下におけるD1タンパク質の分解にはチラコイド膜結合型のプロテアーゼFtsHが関与することが示唆されている。[Yoshioka et al.: J. Biol. Chem. (2006) 281, 21660-9] 本研究ではチラコイド膜からFtsHプロテアーゼの可溶化と精製を試みた。様々な界面活性剤や塩(KSCN, DDM, TritonX-100など)を用いてチラコイド膜からFtsHを可溶化し、アラビドプシスFtsH抗体(anti-VAR2)によるウエスタン分析で可溶化上清中にFtsHプロテアーゼを検出した。FtsHプロテアーゼの可溶化には、0.1-1.0%のDDM(n-dodecyl-β-D-maltoside)が最も有効であった。DDM処理によりチラコイド膜から可溶化したFtsHプロテアーゼの精製には陰イオン交換カラム(HiTrap Q Sepharose FFカラム)を用い、その後精製段階のFtsH画分についてβ-カゼインを基質としたプロテアーゼ活性の有無を調べた。
収録刊行物
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- 日本植物生理学会年会およびシンポジウム 講演要旨集
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日本植物生理学会年会およびシンポジウム 講演要旨集 2008 (0), 0555-0555, 2008
日本植物生理学会
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詳細情報 詳細情報について
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- CRID
- 1390001205630164736
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- NII論文ID
- 130006990744
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- データソース種別
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- JaLC
- CiNii Articles
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- 抄録ライセンスフラグ
- 使用不可