In Situ Hybridization Histochemistry, with Special Emphasis on the Detection of Specific mRNAs in Brain Tissues
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- FUJINAGA Ryutaro
- Department of Functional Neuroanatomy (Anatomy II. ), Yamaguchi University Graduate School of Medicine
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- YANAI Akie
- Department of Functional Neuroanatomy (Anatomy II. ), Yamaguchi University Graduate School of Medicine
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- KOKUBU Kenji
- Department of Functional Neuroanatomy (Anatomy II. ), Yamaguchi University Graduate School of Medicine
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- SHINODA Koh
- Department of Functional Neuroanatomy (Anatomy II. ), Yamaguchi University Graduate School of Medicine
Bibliographic Information
- Other Title
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- In situ ハイブリダイゼーション法によるmRNAの検出～特に脳組織を対象として～
- In situ ハイブリダイゼーションホウ ニ ヨル mRNA ノ ケンシュツ : トクニ ノウ ソシキ オ タイショウ ト シテ
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Abstract
In situ hybridization（ISH）法は，組織切片，細胞，染色体に存在する特定の核酸シークエンスの局在を検出する方法であり，本稿では，ジゴキシゲニン標識cRNAプローブを用いた脳凍結切片上でのmRNA検出方法について紹介する．ISH法は，対象となる組織の形態を保持した状態でmRNA発現部位を可視化するため，特に脳などの高度に不均一な組織を扱うときには有利である．最初にISHを行うときは，次に示す事項に注意するとよい：１）適切なプローブのデザイン，２）浮遊法によるハイブリダイゼーション，３）アルカリフォスファターゼ発色系の使用，４）stringencyの条件検討．つまり，感度をよくするために長鎖プローブとアルカリフォスファターゼ発色系を用いた浮遊法ISHを行い，ハイブリダイゼーションの温度条件をコントロールすることで特異的かつ安定したデータが得られる．今回紹介するISH法を基本として，二重染色，動物胚を用いたホールマウントISH，電子顕微鏡への応用なども可能である．
Journal
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- Yamaguchi Medical Journal
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Yamaguchi Medical Journal 63 (2), 83-87, 2014
Yamaguchi University Medical Association
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Keywords
Details 詳細情報について
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- CRID
- 1390282679811228160
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- NII Article ID
- 130004897872
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- NII Book ID
- AN00243156
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- ISSN
- 18804462
- 05131731
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- NDL BIB ID
- 025529508
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- Text Lang
- ja
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- Data Source
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- JaLC
- NDL
- Crossref
- CiNii Articles
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- Abstract License Flag
- Disallowed
