ジャガイモYウイルスえそ系統に対するモノクローナル抗体作製とELISAによる検出

• 堀田, 治邦

• 佐々木, 純

• 竹内, 徹

書誌事項

タイトル別名

• Production of monoclonal antibodies to recombinant coat protein of Potato virus Y and their effectiveness for virus detection by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA)
• ジャガイモ Yウイルスエソケイトウ ニ タイスル モノクローナル コウタイ サクセイ ト ELISA ニ ヨル ケンシュツ

抄録

ジャガイモYウイルスえそ系統(PVY-N)の外被タンパク質(CP)を大腸菌で発現させ，これに対するモノクローナル抗体（MAb)を作製し，ELISA法への適用を検討した。RT-PCRによって増幅させたCP遺伝子をpMAL-c2X発現ベクターにクローニングし，大腸菌に形質転換後，タンパク質を発現させてPVY-NのCPを得た。これをマウスに免疫し，PVY-Nタバコ罹病葉(以下，罹病葉)を用いて血清の抗体価を測定後，マウスを選定し，ハイブリドーマを作製した。限界希釈して得たクローンについて罹病葉を抗原としたスクリーニングを行い，PVY-Nに広く反応するMAbを得た。MAb D5を用いて直接吸着法(PTA-ELISA)，ELISA法の二重抗体サンドイッチ法(DAS-ELISA)，三重抗体サンドイッチ法(TAS-ELISA)に用いたところ，いずれのELISAにも適用でき，DAS-ELISAおよびTAS-ELISAでは罹病葉の10 4希釈，PTA-ELISAでは10 5希釈まで反応が認められた。また，MAb D5は抗原吸着を37℃で1時間，標識抗体を37℃で1時間反応させる直接法PTA-ELISAにも適用でき，その感度は罹病葉の10 4希釈までであった。MAb D5株はすべてのPVY-Nウイルス株を検出したが，一部のPVY-Oウイルス株にも反応した。

収録刊行物

• 北海道立総合研究機構農業試験場集報 = Bulletin of Hokkaido Research Organization Agricultural Experiment Stations

  北海道立総合研究機構農業試験場集報 = Bulletin of Hokkaido Research Organization Agricultural Experiment Stations (98), 65-75, 2014-06

  長沼町 (北海道) : 北海道立総合研究機構農業研究本部

詳細情報

• CRID: 1050845763681454848
• NII論文ID: 40020160627
• NII書誌ID: AA12521265
• ISSN: 21861048
• NDL書誌ID: 025692265
• Web Site: https://agriknowledge.affrc.go.jp/RN/2030872596
• Web Site: https://ndlsearch.ndl.go.jp/books/R000000004-I025692265
• 本文言語コード: ja
• 資料種別: journal article
• データソース種別:
  • IRDB
  • NDL
  • CiNii Articles