胆汁酸代謝を利用した腸管内細菌発育評価法の研究 : ウルソデオキシコール酸のパラアミノ安息香酸抱合体について

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著者

    • 前田, 頼伸 マエダ, ヨリノブ

書誌事項

タイトル

胆汁酸代謝を利用した腸管内細菌発育評価法の研究 : ウルソデオキシコール酸のパラアミノ安息香酸抱合体について

著者名

前田, 頼伸

著者別名

マエダ, ヨリノブ

学位授与大学

広島大学

取得学位

薬学博士

学位授与番号

乙第2037号

学位授与年月日

1990-07-26

注記・抄録

博士論文

従来、腸管内細菌活性度を評価する方法として14Cでラベルしたグリココール酸(GCA)投与による呼気テストや、14Cでラベルしたキシロース投与による呼気テストがあり、腸内細菌の異常に増殖するblind loop syndromeの様な病態の診断に有効であることが報告されている。しかし、これちの方法は放射性同位元素を使用すること、測定が煩雑であることなど幾つかの欠点を有し少なくとも我が国での臨床には適さない。そこでこれちの欠点を解消すべく新たにウルソデオキシコール酸(UDCA)のパラアミノ安息香酸(PABA)抱合体、ウルソデオキシコリル-パラアミノ安息香酸(PABA-UDCA)を合成し、本物質経口投与後の尿中PABA排泄量の測定による腸管内細菌発育の新評価法の開発を試みた。(1)PABA-UDCAは、PABAとUDCAを出発物質とし、グリシンまたはタウリン抱合胆汁酸合成法と同一手法により縮合させることによって収率よく合成できた。(2)PABA-UDCAは、膵酵素混合物であるパンクレアチン、カルボキシペプチダーゼA、カルボキシベプチダーゼB、トリプシン、α-キモトリプシン、肝ホモジネート、小腸粘膜ホモジネート、及び、血清によっては水解されず、腸内細菌のClostridium perfringensから分離、精製されたコリルグリシンヒドロラーゼによってよく脱抱合され、Lineweaver-Burk式よるMichaelis定数(Km値)3.74mMを示した。この値は、同様の操作によって得られたヒトの主要胆汁酸であるGCAのKm値3.6mMと近似しており、本物質がGCAと同様に腸内細菌に由来する水解酵素の良い基質であることが判明した。(3)PABA-UDCAの各種腸内細菌による脱抱合を検討した結果、この非天然型抱合胆汁酸は、内因性胆汁酸のGCAと同様に好気性菌であるEnterococcus faecalis, Lactobacillus acidophilus, StaPhylococcus epidemidis及び嫌気性菌であるBacteroides fragilis, Bifidobacterim adlescentis, Bifidobacterim longum, Clostridium perfringens, Eubacterium aerofaciens及びFusobacterium variumにより脱抱合されることが判明した。(4)PABAは小腸からだけでなく大腸からも受動輸送によって吸収されること、並びに、PABA-UDCAは回腸末端から能動輸送により吸収され、従って、内因性胆汁酸と同様に腸肝循環を営むことが判明した。(5)PABAの吸収と排泄は、腸内細菌数により影響を受けないこと、また、PABA投与3時間後には、既に78%が尿中に排泄されていることを明らかにした、これはPABAが腸内細菌発育活性度評価のトレーサーとして優れた性質を有していることを示している。(6)PABA-UDCA経口投与による6時間尿中PABA排泄量を検討したところ、腸管内を制腐した抗菌剤処置群では、無処置群に比し、2/3から1/25に有意に低下した。また、外科的に小腸の腸管内停滞係蹄を作製することにより、腸管内細菌異常増殖状態を人工的に生じせしめたものでは無処置群の約2倍と有意に高い値を示した。これらの糞便中の細菌数は尿中PABA排泄量の結果を裏付けるものであり、PABA-UDCA投与後の尿中PABA量の測定によって腸内細菌発育状態が評価できることを確立した。以上、PABA-UDCAは経口投与後、内因性胆汁酸と同様に腸肝循環を営み、その間に腸内細菌により脱抱合されて生じたPABAは腸から吸収され、尿中に排泄される。したがって本物質投与後、6時間の尿中PABA排泄量の測定は、PABA-UDCAの脱抱合の程度、即ち、腸内細菌の発育状態を反映することが明らかとなり、PABA-UDCAテストは、14CラベルのGCA呼気テストに優る、我が国でも使用できる、簡便で安全な信頼性の高い腸内細菌発育状態の新評価法であると考える。

目次 / p1序論 / p3本論 / p8第一章 胆汁酸抱合体の合成 / p11 第一節 ウルソデオキシコール酸のパラアミノ安息香酸抱合体(PABA一UDCA)の合成 / p11 第二節 ウルソデオキシコール酸のL-ロイシン抱合体の合成 / p14 第三節 ウルソデオキシコール酸のL-リジン抱合体の合成 / p14 第四節 各種胆汁酸抱合体の純度 / p15 小括 / p15第二章 胆汁酸抱合体の酵素水解 / p16 第一節 パンクレアチンの影響 / p18 第二節 カルボキシペプチダーゼAの影響 / p18 第三節 カルボキシペプチダーゼBの影響 / p20 第四節 トリプシンの影響 / p20 第五節 α-キモトリプシンの影響 / p20 第六節 血清中酵素の影響 / p20 第七節 肝ホモジネートの影響 / p21 第八節 小腸粘膜上皮ホモジネートの影響 / p21 第九節 細菌性コリルグリシンヒドロラーゼの影響 / p21 小括 / p23第三章 PABA-UDCAに対する腸管内細菌の脱抱合能 / p24 第一節 好気性菌の影響 / p24 第二節 嫌気性菌の影響 / p26 小括 / p27第四章 PABAとPABA-UDCAの吸収挙動 / p28 第一節 PABAの吸収 / p28 第二節 PABA-UDCAの吸収 / p30 小括 / p31第五章 PABA-UDCAの動物投与試験 / p34 第一節 PABAの投与試験 / p35 第二節 最小有効採尿時間 / p35 第三節 無処置群について / p35 第四節 抗菌剤処置群について / p37 第五節 腸管内停滞係蹄群について / p39 第六節 糞便中の細菌数について / p39 小括 / p40総括 / p41要約 / p46実験の部 / p48文献 / p57謝辞 / p61

目次

  1. 目次 / p1 (0006.jp2)
  2. 序論 / p3 (0007.jp2)
  3. 本論 / p8 (0010.jp2)
  4. 第一章 胆汁酸抱合体の合成 / p11 (0011.jp2)
  5. 第一節 ウルソデオキシコール酸のパラアミノ安息香酸抱合体(PABA一UDCA)の合成 / p11 (0011.jp2)
  6. 第二節 ウルソデオキシコール酸のL-ロイシン抱合体の合成 / p14 (0013.jp2)
  7. 第三節 ウルソデオキシコール酸のL-リジン抱合体の合成 / p14 (0013.jp2)
  8. 第四節 各種胆汁酸抱合体の純度 / p15 (0013.jp2)
  9. 小括 / p15 (0013.jp2)
  10. 第二章 胆汁酸抱合体の酵素水解 / p16 (0014.jp2)
  11. 第一節 パンクレアチンの影響 / p18 (0015.jp2)
  12. 第二節 カルボキシペプチダーゼAの影響 / p18 (0015.jp2)
  13. 第三節 カルボキシペプチダーゼBの影響 / p20 (0016.jp2)
  14. 第四節 トリプシンの影響 / p20 (0016.jp2)
  15. 第五節 α-キモトリプシンの影響 / p20 (0016.jp2)
  16. 第六節 血清中酵素の影響 / p20 (0016.jp2)
  17. 第七節 肝ホモジネートの影響 / p21 (0016.jp2)
  18. 第八節 小腸粘膜上皮ホモジネートの影響 / p21 (0016.jp2)
  19. 第九節 細菌性コリルグリシンヒドロラーゼの影響 / p21 (0016.jp2)
  20. 小括 / p23 (0017.jp2)
  21. 第三章 PABA-UDCAに対する腸管内細菌の脱抱合能 / p24 (0018.jp2)
  22. 第一節 好気性菌の影響 / p24 (0018.jp2)
  23. 第二節 嫌気性菌の影響 / p26 (0019.jp2)
  24. 小括 / p27 (0019.jp2)
  25. 第四章 PABAとPABA-UDCAの吸収挙動 / p28 (0020.jp2)
  26. 第一節 PABAの吸収 / p28 (0020.jp2)
  27. 第二節 PABA-UDCAの吸収 / p30 (0021.jp2)
  28. 小括 / p31 (0021.jp2)
  29. 第五章 PABA-UDCAの動物投与試験 / p34 (0023.jp2)
  30. 第一節 PABAの投与試験 / p35 (0023.jp2)
  31. 第二節 最小有効採尿時間 / p35 (0023.jp2)
  32. 第三節 無処置群について / p35 (0023.jp2)
  33. 第四節 抗菌剤処置群について / p37 (0024.jp2)
  34. 第五節 腸管内停滞係蹄群について / p39 (0025.jp2)
  35. 第六節 糞便中の細菌数について / p39 (0025.jp2)
  36. 小括 / p40 (0026.jp2)
  37. 総括 / p41 (0026.jp2)
  38. 要約 / p46 (0029.jp2)
  39. 実験の部 / p48 (0030.jp2)
  40. 文献 / p57 (0034.jp2)
  41. 謝辞 / p61 (0036.jp2)
  42. The Rapid Evaluation of Intestinal Bacterial Growth Using a Conjugate of Ur-sodeoxycholic Acid with para-Aminobenzoic Acid / (0041.jp2)
  43. Hydrolysis and Absorption of a Conjugate of Ursodeoxycholic Acid with para-Aminobenzoic Acid / (0047.jp2)
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各種コード

  • NII論文ID(NAID)
    500000072962
  • NII著者ID(NRID)
    • 8000000073157
  • DOI(NDL)
  • 本文言語コード
    • jpn
  • NDL書誌ID
    • 000000237276
  • データ提供元
    • 機関リポジトリ
    • NDL-OPAC
    • NDLデジタルコレクション
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