好熱性放線菌Thermoactinomyces vulgaris R-47のデキストリン利用に関与する遺伝子クラスターのクローニングとサイクロデキストリン結合タンパク質の性質 Cloning of a Gene Cluster for Dextrin Utilization from Thermoactinomyces vulgaris R-47 and Characterization of the Cyclodextrin-binding Protein

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Author(s)

    • ヨピ YOPI
    • 東京農工大学農学部応用生物科学科 Department of Applied Biological Science, Tokyo University of Agriculture and Technology
    • 殿塚 隆史 TONOZUKA Takashi
    • 東京農工大学農学部応用生物科学科 Department of Applied Biological Science, Tokyo University of Agriculture and Technology
    • 坂野 好幸 SAKANO Yoshiyuki
    • 東京農工大学農学部応用生物科学科 Department of Applied Biological Science, Tokyo University of Agriculture and Technology

Abstract

Thermoactinomyces vulgaris R-47の生産するプルランおよびサイクロデキストリンを分解するα-アミラーゼ(TVAII)の生体内における役割を調べるため,TVAII遺伝子の上流にある遺伝子をクローニングし塩基配列を決定した.約5kbp断片中に五つのオープンリーディングフレーム,ORF-1~-5が同定され,ORF-1,-2と-3の遺伝子産物はEscherichia coliのマルトースやKlebsiella oxytocaのサイクロデキストリンの糖代謝系に関するタンパク質と相同性を示した.ORF-3タンパク質は糖結合タンパク質(E.coliのMalEやK.oxytocaのCymE)と相同性があることが見出された.さらにORF-3について発現ベクターを構築し,発現ORF-3タンパク質の精製および性質を調べた.ORF.3タンパク質はマルトースよりもサイクロデキストリンと高い結合能を有するので,本タンパク質はサイクロデキストリン結合タンパク質であることが明らかとなった.

To investigate the physiological role of an α-amylase, TVA II from Thermoactinomyces vulgaris R-47, which hydrolyze cyclodextrins and pullulan, a region located upstream of the TVA II gene was cloned and sequenced. Five open reading frames, designated as ORF-1 to -5, were found in a fragment of about 5 kbp. Three of these genes, ORF-1, -2 and -3, were homologous to the genes which encode proteins related to the sugar metabolic systems, such a maltose system of Esch erichia coli and cyclodextrin metabolic system of Klebsiella oxytoca. An expression vector for the ORF-3 protein, which was similar to maltose-binding protein from E. coli (MalE) and a cyclodextrinbinding protein from K. oxytoca (CymE), was constructed, and the expressed ORF-3 protein was purified. The ORF-3 protein was a cyclodextrin-binding protein because of having a higher binding ability for cyclodextrins than for maltose.

Journal

  • Journal of Applied Glycoscience

    Journal of Applied Glycoscience 49(2), 107-114, 2002-04-01

    The Japanese Society of Applied Glycoscience

References:  22

Cited by:  1

Codes

  • NII Article ID (NAID)
    10008253471
  • NII NACSIS-CAT ID (NCID)
    AN10453916
  • Text Lang
    ENG
  • Article Type
    Journal Article
  • ISSN
    13403494
  • NDL Article ID
    6142247
  • NDL Source Classification
    ZP24(科学技術--化学・化学工業--糖・澱粉)
  • NDL Call No.
    Z17-15
  • Data Source
    CJP  CJPref  NDL  J-STAGE  JASI 
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