ヨードチロシンの部位特異的導入と長波長X線を用いた単波長異常分散法による結晶構造解析

  • 村山 和隆
    東北大学大学院医工学研究科分子構造解析医工学分野
  • 坂本 健作
    理化学研究所・生命分子システム基盤研究領域・拡張遺伝暗号システム研究チーム

書誌事項

タイトル別名
  • Site-specific Incorporation of 3-Iodo-L-tyrosine into Proteins and Single-wavelength Anomalous Dispersion Phasing with Soft X-ray in Protein Crystallography
  • ヨードチロシン ノ ブイ トクイテキ ドウニュウ ト チョウハチョウ Xセン オ モチイタ タンハチョウ イジョウ ブンサンホウ ニ ヨル ケッショウ コウゾウ カイセキ

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抄録

Iodine is a good anomalous scatter for radiations from in-house X-ray generators (Cu/CrKα). Non-natural amino acid, 3-iodo-L-tyrosine, is able to be site-specifically incorporated into proteins with amber suppresser tRNA and mutated TyrRS from M. jannaschii in the E. coli expression system. To determine the crystal structure of acetyl transferase from T. thermophilus, iodotyrosine-containing proteins were prepared and crystallized. Structure determination was successfully conducted with the protein variant with iodotyrosine at position 111. Anomalous signals from iodotyrosine with Cu/CrKα radiations were both sufficient to calculate clear electron density map. In the crystal structure, iodotyrosine did not significantly disturb the native structure.

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