フローインジェクション/固定化酵素分光光度法による尿中硫酸抱合胆汁酸の測定法の開発

書誌事項

タイトル別名
  • Development of a rapid analytical method for the determination of sulfated bile acids in urine based on flow-injection spectrophotometry by using immobilized enzyme technology.
  • 技術論文 フローインジェクション/固定化酵素分光光度法による尿中硫酸抱合胆汁酸の測定法の開発
  • ギジュツ ロンブン フロー インジェクション コテイカ コウソ ブンコウ コウドホウ ニ ヨル ニョウ チュウ リュウサン ホウゴウ タンジュウサン ノ ソクテイホウ ノ カイハツ

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抄録

本論文は,新規酵素胆汁酸硫酸スルフェターゼ(BSS)とWST-5を用いて,迅速,簡便,高感度な硫酸抱合胆汁酸(SBA)のFIA/分光光度分析法を開発した.測定原理は次のとおりである.SBAはBSSにより脱硫酸化し,3β-ヒドロキシステロイドが生成する.この3β-ヒドロキシステロイドが3β-ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ(3β-Hydroxysteroid dehydrogenase: 3β-HSD)の触媒作用下でNADと反応し,NADHを生成する.次にジアホラーゼによりWST-5がNADHと反応して水溶性のホルマザンブルーを生成する.この生成物は,550 nmに吸収極大があるので,その吸光度によってSBAを定量した.本法は分析速度が15検体/h,相対標準偏差は1~5.4% であり,測定の範囲は1~75 μMであった.<br>

収録刊行物

  • 分析化学

    分析化学 52 (3), 195-200, 2003

    公益社団法人 日本分析化学会

参考文献 (12)*注記

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