ネコヘルペスウイルス1型糖蛋白質の感染細胞内における局在部位およびエピト-プマッピング〔英文〕  [in Japanese] Intracellular localization and epitope mapping of feline herpesvirus type 1 glycoproteins.  [in Japanese]

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Abstract

ネコヘルペスウイルス1型(FHV-1)糖蛋白質(gp)の感染細胞内における局在部位と輸送を調べるために, 単クローン性抗体による間接蛍光抗体法(IFA)を経時的に行った. 抗gp143/108抗体による蛍光はウイルス感染4時間後に細胞膜と核膜部位において初めて認められ, 8時間目以後は核周囲および細胞質内にも明瞭な蛍光が見られた. gp113に対しても同様の部位において反応が見られたが, 8時間目までは蛍光が認められなかった. 一方, 抗gp60抗体による蛍光は感染12時間後に核の近傍および周囲に初めて認められ, 16時間後には核内に, また20時間後には細胞質内にも蛍光が認められた. さらに, これら3種類の糖蛋白質は感染細胞膜表面にも発現されていることが, 未固定感染細胞を用いたIFAにより明らかになった. 次に, ELISA additivity試験により各糖蛋白質上のエピトープマッピングを行ったところ, gp113は2ドメインにより構成されており, そのうち一つは, 部分的に重複する3エピトープを持つウイルス中和反応に関与するドメインであると考えられた. 一方, gp143/108には重複領域を持つ5エピトープで構成される一つの抗原領域が存在し, そのうち1エピトープはこの糖蛋白質を認識する全ての単クローン性抗体と反応するものと考えられた.

Monoclonal antibodies (MoAbs) were used to characterize feline herpesvirus type 1 (FHV-1) glycoproteins (gp). Intracellular localization and transport of these proteins as revealed by a sequential indirect immunofluorescence assay (IFA) on fixed infected cells showed slight differences between FHV-1 gp143/108 and gp113. Antibodies against gp143/108 first showed membrane fluorescence at 4 hrs post-infection (PI) followed by a pronounced perinuclear and cytoplasmic staining from 8 hrs PI onwards. Those reacting with gp113 showed the same pattern but fluorescence did not appear until 8 hrs PI . In contrast, MoAbs against gp60 first showed para- and perinuclear staining at 12 hrs PI which became intranuclear at 16 hrs PI, followed by intracytoplasmic staining at 20 hrs PI. Sequential IFA of unfixed infected cells revealed that the three glycoproteins were expressed on the cell surface membrane as well. Topographical mapping of the functional epitopes of gp113 by ELISA additivity test indicated the presence of 2 antigenic domains-a neutralizing domain consisting of 3 overlapping epitopes and a non-neutralizing domain. On the other hand, gp143/108 contained only one antigenic site consisting of 5 similar or overlapping epitopes, one of which seemed to be a conserved region recognized by all MoAbs reacting to this protein.

Journal

  • The Japanese journal of veterinary science

    The Japanese journal of veterinary science 52(2), p351-359, 1990-04

    Japanese Society of Veterinary Science

Cited by:  1

Codes

  • NII Article ID (NAID)
    110003918197
  • NII NACSIS-CAT ID (NCID)
    AA10521639
  • Text Lang
    JPN
  • Article Type
    Journal Article
  • ISSN
    00215295
  • NDL Article ID
    3671169
  • NDL Source Classification
    RB86(畜産--家畜--犬・猫)
  • NDL Source Classification
    ZR22(科学技術--農林水産--畜産)
  • NDL Call No.
    Z18-350
  • Data Source
    CJPref  NDL  NII-ELS  IR 
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