歯髄細胞のグリコサミノグリカン産生に及ぼす塩基性線維芽細胞増殖因子(FGF-2)の影響に関する研究 The Effects of FGF-2 on the Production of Glycosaminoglycan by Human Dental Pulp Cells

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著者

    • 島袋 善夫 SHIMABUKURO Yoshio
    • 大阪大学大学院歯学研究科口腔分子免疫制御学講座(口腔治療学教室) Department of Periodontology, Division of Oral Biology and Disease Control Osaka University Graduate School of Dentistry
    • 植田 真紀 UEDA Maki
    • 大阪大学大学院歯学研究科口腔分子免疫制御学講座(口腔治療学教室) Department of Periodontology, Division of Oral Biology and Disease Control Osaka University Graduate School of Dentistry
    • 寺島 祥充 TERASHIMA Yoshimitsu
    • 大阪大学大学院歯学研究科口腔分子免疫制御学講座(口腔治療学教室) Department of Periodontology, Division of Oral Biology and Disease Control Osaka University Graduate School of Dentistry
    • 寺倉 まみ TERAKURA Mami
    • 大阪大学大学院歯学研究科口腔分子免疫制御学講座(口腔治療学教室) Department of Periodontology, Division of Oral Biology and Disease Control Osaka University Graduate School of Dentistry
    • 橋川 智子 HASHIKAWA Tomoko
    • 大阪大学大学院歯学研究科口腔分子免疫制御学講座(口腔治療学教室) Department of Periodontology, Division of Oral Biology and Disease Control Osaka University Graduate School of Dentistry
    • 山田 聡 YAMADA Satoru
    • 大阪大学大学院歯学研究科口腔分子免疫制御学講座(口腔治療学教室) Department of Periodontology, Division of Oral Biology and Disease Control Osaka University Graduate School of Dentistry
    • 寺嶋 宏曜 TERASHIMA Hiroaki
    • 大阪大学大学院歯学研究科口腔分子免疫制御学講座(口腔治療学教室) Department of Periodontology, Division of Oral Biology and Disease Control Osaka University Graduate School of Dentistry
    • 市川 朋生 ICHIKAWA Tomoo
    • 大阪大学大学院歯学研究科口腔分子免疫制御学講座(口腔治療学教室) Department of Periodontology, Division of Oral Biology and Disease Control Osaka University Graduate School of Dentistry
    • 村上 伸也 MURAKAMI Shinya
    • 大阪大学大学院歯学研究科口腔分子免疫制御学講座(口腔治療学教室) Department of Periodontology, Division of Oral Biology and Disease Control Osaka University Graduate School of Dentistry

抄録

ヒト歯髄細胞による,グリコサミノグリカンであるヒアルロン酸およびヘパラン硫酸産生に及ぼすFGF-2の影響について検討を行った.矯正による便宜抜去の歯から歯髄を除去し,10%FCSを含むα-MEMにて継代を行い歯髄細胞として実験に供した.Alkaline phosphatase(ALPase)活性はBesseyらの方法に準じて測定し,硬組織形成能はDahlらの方法に準じて解析した.ヒアルロン酸およびヘパラン硫酸量はそれぞれ,ヒアルロン酸結合タンパクを応用した競合法あるいはエライザ法を用いて測定した.各種細胞外基質発現,ヒアルロン酸合成酵素,およびヘパラン硫酸合成関連酵素のmRNA発現はRT-PCR法を用いて解析した.ヒト歯髄細胞は4種のFGF受容体を発現していた.FGF-2は10mmol/lβ-グリセロリン酸と50μg/ml L-アスコルビン酸を加えた石灰化培地にて,長期培養時に上昇するALPase活性および石灰化ノジュール形成を可逆的に抑制した.FGF-2はヒト歯髄細胞によるI型コラーゲン,DMP-1,およびDSPP mRNA発現を抑制した.一方,ヒト歯根膜細胞に対しては,I型コラーゲン発現とPLAP-1の発現を抑制した.III型コラーゲンに対しては両細胞とも変化がなかった.ヒト歯髄細胞はFGF-2刺激を受けてもヘパラン硫酸産生は変化しなかったのに対し,一方,ヒト歯根膜細胞はFGF-2刺激を受けてヘパラン硫酸産生量が増加した.また,ヘパラン硫酸合成関連酵素は両細胞ともFGF-2刺激を受けても変化しなかった.ヒアルロン酸の産生に関しては,ヒト歯髄細胞およびヒト歯根膜細胞ともにFGF-2刺激を受けて,ヒアルロン酸の産生亢進とHAS1およびHAS2 mRNA発現の亢進が認められた.以上のことより,FGF-2はヒト歯髄細胞のプロテオグリカン産生を調節しており,歯根膜細胞のそれとは異なっていることが示唆された.

We studied the effects of FGF-2 on the production of hyaluronan and heparan sulfate, glycosaminoglycan, by human dental pulp cells (HDPC). HDPC were isolated from healthy dental pulp of the first premolar teeth of individuals undergoing tooth extraction for orthodontic treatment and were cultured with α-MEM in the presence of 10% FCS. Alkaline phosphatase (ALPase) activity was determined by the method of Bessey et al. and calcified nodule formation was analyzed using Dahl's method. Production of hyaluronan and heparan sulfate was analyzed by competitive assay using hyaluronan-binding protein and ELISA assay, respectively. mRNA expression of extracellular matrix, hyaluronan synthetic enzyme and heparan sulfate synthesis-related enzymes was analyzed by a reverse transcription-polymerase chain reaction assay. HDPC expressed four kinds of FGF receptor mRNAs. FGF-2 reversely suppressed ALPase activity and formation of calcified nodules by HDPC, which were cultured with 10mmol/l β-glycerophosphate and 50μg/ml L-ascorbic acid. FGF-2 inhibited expression of collagen type I, DMP-1, and DSPP mRNA by HDPC and expression of collagen type I and PLAP-1 mRNA by human periodontal ligament cells (HPLC). FGF-2 did not alter the expression of collagen type III by either HDPC or HPLC. While HDPC did not change the production of heparan sulfate in response to FGF-2, HPLC increased its production. These cells did not change the expression of heparan sulfate synthesis-related enzymes mRNA. FGF-2 enhanced hyaluronan production by both HDPC and HPLC and HAS1 and HAS2 mRNA expression in both cells. This study revealed that FGF-2 modulates the production of proteoglycan by HDPC unlike human periodontal ligament cells.

収録刊行物

  • 日本歯科保存学雑誌

    日本歯科保存学雑誌 50(2), 146-161, 2007

    特定非営利活動法人 日本歯科保存学会

参考文献:  95件中 1-95件 を表示

各種コード

  • NII論文ID(NAID)
    110007151164
  • NII書誌ID(NCID)
    AN00191201
  • 本文言語コード
    JPN
  • 資料種別
    ART
  • ISSN
    03872343
  • データ提供元
    CJP書誌  NII-ELS  J-STAGE 
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