リアルタイム定量PCR(qPCR)法による唾液中の総細菌数の測定 : 口腔清潔度の指標としての試み  [in Japanese] Measurement of the Total Number of Bacteria in Saliva Using Quantitative Real-time PCR (qPCR) : Evaluation of the oral hygiene status  [in Japanese]

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Author(s)

    • 福井 誠 FUKUI Makoto
    • 徳島大学大学院ヘルスバイオサイエンス研究部予防歯学分野 Department of Preventive Dentistry, Institute of Health Biosciences, The University of Tokushima Graduate School
    • 増田 かなめ [他] MASUDA Kaname
    • 徳島大学大学院ヘルスバイオサイエンス研究部予防歯学分野 Department of Preventive Dentistry, Institute of Health Biosciences, The University of Tokushima Graduate School
    • 高松 夏子 TAKAMATSU Natsuko
    • 徳島大学大学院ヘルスバイオサイエンス研究部予防歯学分野 Department of Preventive Dentistry, Institute of Health Biosciences, The University of Tokushima Graduate School
    • 片岡 宏介 KATAOKA Kosuke
    • 徳島大学大学院ヘルスバイオサイエンス研究部予防歯学分野 Department of Preventive Dentistry, Institute of Health Biosciences, The University of Tokushima Graduate School
    • 伊藤 博夫 ITO Hiro-O
    • 徳島大学大学院ヘルスバイオサイエンス研究部予防歯学分野 Department of Preventive Dentistry, Institute of Health Biosciences, The University of Tokushima Graduate School

Abstract

口腔清潔度の指標としては,歯面への歯垢の付着度を測定する方法が一般的であるが,診査や記録等の人材的,時間的負担を要することから,集団歯科健診で用いられることは少ない.集団歯科健診においてう蝕や歯周疾患,口臭症のリスクを評価するために,簡便かつ有効な口腔清潔度の評価法の開発が望まれている.リアルタイム定量PCR(qPCR)法による唾液中の総細菌数の測定は,検体の採取や保管が容易で多検体の一括処理が可能であることから,本目的に合致する有望な測定法であると考えられる.本研究では,qPCR法を用いた唾液中の総細菌数の測定が口腔清潔度の評価法として使用できるかどうか検討を行った.5名のボランティアから,ブラッシング中断時と再開後の2回,刺激唾液を採取し,唾液中の総細菌数をqPCR法により測定したところ,Debris Index,O'LearyのPCR値との間に相関は示されなかったものの,ブラッシング再開後では,中断時に比べ,有意に減少した.81名の被験者から4ヵ月の間隔を空けて2回刺激唾液を採取し,唾液中の総細菌数をqPCR法により測定したところ,前後の間に有意な正の相関を認めた.以上の結果より,qPCR法によって唾液中の総細菌数を測定することが可能であることが示された.本法は非常に簡便であることから,今後,口腔清潔度を検討する分野において応用できる可能性が考えられる.

The state of oral hygiene has been evaluated by employing various indices, such as the Oral Hygiene Index, Plaque Index, Patient Hygiene Performance, and Plaque Control Record (O'Leary's PCR). Measuring the scores of these indices is time- and labor-consuming, requiring manual reading and recording by professionals, standardization of examination methods. In contrast, measuring the total number of bacteria in saliva using quantitative real-time PCR (qPCR) allows the straightforward collection and storage of samples, making it possible to measure many samples at the same time. This technique facilitates the quantification of the number of bacteria within a shorter time than the culture method. In the present study, the total number of bacteria measured by qPCR was found to be significantly decreased (p<0.05) in stimulated whole saliva collected from 5 volunteers by chewing paraffin after tooth cleaning. These findings were in agreement with the decreases shown by Greene's Debris Index and O'Leary's PCR values. There was a significant correlation (r=0.55, p<0.01) between the salivary bacterial counts measured by qPCR from 81 subjects before and after a 4-month interval. These findings suggest that it is possible to measure the total number of bacteria in saliva using qPCR. This technique is convenient and is suggested to be applicable for assessing the oral hygiene status in the future.

Journal

  • JOURNAL OF DENTAL HEALTH

    JOURNAL OF DENTAL HEALTH 59(3), 183-189, 2009

    Japanese Society for Oral Health

References:  22

Codes

  • NII Article ID (NAID)
    110008460531
  • NII NACSIS-CAT ID (NCID)
    AN00081407
  • Text Lang
    JPN
  • Article Type
    ART
  • ISSN
    0023-2831
  • NDL Article ID
    10398297
  • NDL Source Classification
    ZS44(科学技術--医学--歯科学・口腔外科学)
  • NDL Call No.
    Z19-144
  • Data Source
    CJP  NDL  NII-ELS  J-STAGE 
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