CRISPR/Cas9を用いたMC3T3-E1細胞におけるGpr81遺伝子のノックアウト

• 前田, 豊信

• 鈴木, 厚子

• 湯澤, 仁

• 馬場, 優

• 加藤, 靖正

抄録

CRISPR/Cas9を用いたMC3T3-E1細胞におけるGpr81遺伝子のノックアウトについて検討した。遺伝子導入したMC3T3-E1細胞株(KO)45株のGpr81遺伝子発現量をRT-qPCRで定量しβ-アクチンで補正し、野生型比で72.4%%であった。このうち、約50%の発現を示したものと、50%以下の発現であったものを各1株(KO41、KO16)選択した。KO41細胞株、KO16細胞株ともに野生型に比べて、Gpr81遺伝子発現の有意な減少が認められた。野生型MC3T3-E1細胞と比較して、形態的変化は認めなかった。野生型MC3T3-E1細胞、KO41細胞株、KO16細胞株からゲノム抽出を行った。1.5%アガロースゲルで電気泳動を行い、ともに約1000bpのDNA断片がシングルバンドとして確認した。KO16株ではPAM配列から-7～-4までの4塩基が欠損し、-3に変異が挿入されていた。

収録刊行物

• 奥羽大学歯学誌

  奥羽大学歯学誌 41巻 (3-4号), 123-128-, 2014-12

キーワード

• 塩基配列; *骨芽細胞; 分散分析; ウエスタンブロッティング; *3T3細胞; ノックアウトマウス; *G-Protein-Coupled Receptors(欠損・欠乏); *CRISPR
• *GPR81 Protein(欠損・欠乏)
• マウス; 動物; 歯学

詳細情報

• CRID: 1050845762554461952
• NII論文ID: 120005759844
• ISSN: 09162313
• Web Site: https://ohu-lib.repo.nii.ac.jp/records/4044
• Web Site: https://search.jamas.or.jp/link/ui/2015208423
• 資料種別: departmental bulletin paper
• データソース種別:
  • IRDB
  • CiNii Articles
  • KAKEN