培養歯肉線維芽細胞におけるクリプトタンシノンによる炎症関連分子の産生抑制効果 Inhibitory Effects of Cryptotanshinone on Inflammation-related Molecules in Human Gingival Fibroblasts

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著者

    • 梶浦 由加里 Yukari KAJIURA
    • 徳島大学大学院ヘルスバイオサイエンス研究部 再生修復医歯学部門 顎口腔病態制御学講座 歯周歯内治療学分野 Department of Periodontology and Endodontology, Institute of Health Biosciences, The University of Tokushima Graduate School
    • 西川 泰史 Yasufumi NISHIKAWA
    • 徳島大学大学院ヘルスバイオサイエンス研究部 再生修復医歯学部門 顎口腔病態制御学講座 歯周歯内治療学分野 Department of Periodontology and Endodontology, Institute of Health Biosciences, The University of Tokushima Graduate School
    • 木戸 淳一 Jun-ichi KIDO
    • 徳島大学大学院ヘルスバイオサイエンス研究部 再生修復医歯学部門 顎口腔病態制御学講座 歯周歯内治療学分野 Department of Periodontology and Endodontology, Institute of Health Biosciences, The University of Tokushima Graduate School
    • 永田 俊彦 Toshihiko NAGATA
    • 徳島大学大学院ヘルスバイオサイエンス研究部 再生修復医歯学部門 顎口腔病態制御学講座 歯周歯内治療学分野 Department of Periodontology and Endodontology, Institute of Health Biosciences, The University of Tokushima Graduate School

抄録

 目的 : 漢方薬 (生薬) タンジンの主成分であるクリプトタンシノンは, 抗がん作用や抗炎症作用をもつことが知られている. しかしながら, クリプトタンシノンが歯周組織の炎症に対してどのような影響を及ぼすのかは不明である. 本研究の目的は, 歯肉線維芽細胞を標的として, その炎症関連分子の産生に及ぼすクリプトタンシノンの影響を調べることである. <br> 方法 : 細胞は歯肉線維芽細胞CRL-2014<sup>TM</sup> (ATCC) を用いた. クリプトタンシノンの濃度依存的な細胞障害作用の有無は, トリパンブルー染色法を用いて各濃度間における生細胞率の差を比較検討して評価した. 歯肉線維芽細胞のサイトカイン産生は, 市販のELISAキットを用いて, インターロイキン (IL) -1βで細胞を24時間刺激した後のIL-6およびVEGF産生量を測定して検討した. 一方, タンパク質分解酵素カテプシンLの産生は, IL-1βで細胞を24時間刺激した後に回収した全細胞タンパク質を用いて, ウエスタンブロット法によって検討した. なお, クリプトタンシノンはIL-1β添加の1時間前に細胞培養系に添加した. 各群における差異は, ANOVA Tukey-KramerのHSD検定によって有意差を検討した. <br> 結果 : クリプトタンシノンは, 10μmol/<i>l</i>までは歯肉線維芽細胞の生細胞率に影響は与えないが, 100μmol/<i>l</i>では有意に生細胞率を低下させた. また, 歯肉線維芽細胞におけるIL-1β誘導性のIL-6産生およびカテプシンL産生は, 10μmol/<i>l</i>クリプトタンシノンの添加によって著明に減少した. 一方, IL-1β誘導性のVEGF産生は, クリプトタンシノンの添加によっても変化しなかった. <br> 結論 : クリプトタンシノンは, 歯肉線維芽細胞におけるIL-1β誘導性IL-6およびカテプシンLの産生を抑制することで, 歯周組織の炎症を抑制する可能性が示唆された.

 Purpose: Cryptotanshinone (CPT) isolated from the root of an Asian medicinal plant, Salvia miltiorrhiza bunge, acts as a potent anti-tumor or anti-inflammatory agent <i>in vitro</i>. However, the effects of CPT on the progression of periodontitis are still unknown. This study investigated the effects of CPT on the production of inflammation-related molecules in human gingival fibroblasts.<br> Methods: Human gingival fibroblasts (HGFs), CRL-2014<sup>TM</sup> (ATCC), were used. Cytotoxicity of the cells by CPT was examined. Dead cells stained by trypan blue were counted and analyzed. Next, the levels of IL-6 and VEGF in IL-1β-treated cells with or without CPT were measured using ELISA kits. The productivity of cathepsin L in IL-1β-treated cells with or without CPT was examined using Western blotting.<br> Results: The ratio of viable cell numbers was significantly decreased by 100 μmol/<i>l</i> CPT. Next, the increase of IL-6 and cathepsin L induced by IL-1β was significantly suppressed by the pretreatment of 10 μmol/<i>l</i> CPT in HGFs. On the other hand, productivity of VEGF induced by IL-1β was not changed by the pretreatment of 10 μmol/<i>l</i> CPT.<br> Conclusion: CPT suppresses IL-1β-induced IL-6 and cathepsin L production in HGFs, and might regulate the progression of periodontitis.

収録刊行物

  • 日本歯科保存学雑誌

    日本歯科保存学雑誌 58(3), 212-218, 2015

    特定非営利活動法人 日本歯科保存学会

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