胃液を検体としたHelicobacter.pylori培養の経験

木田 秀幸, 今野 武津子, 高橋 美智子, 近藤 敬三, 飯田 健一, 佐藤 繁樹, 須賀 俊博

doi:10.14879/nnigss.57.0.312.0

〈緒言〉Helicobacter.pylori（H.pylori）は、グラム陰性の螺旋様桿菌で胃内に感染し胃炎、消化性潰瘍、胃癌、胃MALTリンパ腫などの上部消化管疾患の病態に関与していることが明らかになっている。H.pyloriの診断方法としては、血清及び尿中抗体測定（抗体）、便中抗原測定（HpSA）、尿素呼気試験（UBT）、迅速ウレアーゼ試験、病理組織学的検査、細菌培養などがある。唯一の直接的証明法であるH.pyloriの分離培養は、特異性に優れ菌株保存が可能なため抗菌薬の感受性検査や遺伝子学的解析を行うためには不可欠である。培養に用いる検体は胃粘膜生検が一般的であるが、我々は胃粘膜生検の他に胃液を検体としたH.pylori培養を１９９７年より行なっている。この１０年間の培養経験と成績を報告する。 〈対象と方法〉１９９７年３月から２００８年３月までに腹痛を主訴に、当院小児科を受診し上部消化管内視鏡検査を施行した小児を対象とした。また、血清H.pylori　IgG抗体（血清抗体）あるいは便中H.pylori抗原（HpSA）陽性患児とその家族も対象とした。 患児９５例は内視鏡検査と胃粘膜生検を施行し、その家族でH.pylori陽性の有症状者（既往も含む）にはインフォームドコンセント（I.C.）を得た後、８２例に対し内視鏡下生検あるいは胃液を採取し培養を施行した。除菌後の検体を含む延べ培養総数は、２８９例（胃液培養１１１例、胃粘膜培養１７８例）であった。培地はH.pyloriの選択分離培地である「ニッスイプレート・ヘリコバクター寒天培地」（日水製薬株式会社）を用い、微好気条件下で３５℃（２００５年１０月までは３７℃）ふらん器にて最大１週間の培養を行なった。結果の判定は、発育したコロニーのグラム染色を行い、グラム陰性螺旋菌であることを確認、ウレアーゼ試験、オキシダーゼ試験、カタラーゼ試験陽性となったものをH.pylori培養陽性とした。 〈結果〉HpSA又は血清抗体陽性群７８例の胃液培養では、６８例が陽性で１０例が陰性となり、感度８７％であった。HpSA又は抗体陽性群１１８例の胃粘膜培養では、１０３例が陽性で１５例が陰性となり、感度８７％であった。HpSA又は血清抗体陰性群では胃液培養、胃粘膜培養共に全例が培養陰性であり特異度は１００％であった。培養結果とHpSA及び血清抗体が不一致となった２５例中９例に雑菌発育が認められ培養不可能であった。胃液と胃粘膜の雑菌発育に大きな有意差は認められなかった。１９９８年までは、HpSA又は血清抗体やウレアーゼ試験との不一致例が検体５６例中１８例（３２％）、雑菌発育８例（１４％）と培養成績に良好な結果が得られなかった。不一致１８例中７例（３９％）の原因は雑菌発育によるものであった。しかし、１９９９年以降の不一致は、検体２３３例中７例（３％）、雑菌発育２例（１％未満）と培養成績が明らかに向上した。 〈結語〉我々は、胃液を検体としたH.pyloriの培養を１９９７年から試行錯誤の中行なってきた。１９９８年以前の培養成績と他の検査方法との不一致や雑菌発育は、培地の使用方法や培養条件、検体処理方法等、様々な要因が示唆された。 胃液検体は胃粘膜検体と比較しても十分な培養成績を得ることができた。また、胃液採取は、内視鏡を用いた胃粘膜採取と比較し患者への侵襲性が小さく、採取部位による影響も受けないことからも有用性が高いと考えられる。

胃液を検体とした<I>Helicobacter.pylori</I>培養の経験

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