Epigenetic changes of the Cyp11a1 promoter region in granulosa cells undergoing lutanization during ovulation in rats

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  • ラット顆粒膜細胞の黄体化に伴うCyp11a1 （P450scc）遺伝子発現のepigenetics制御

Abstract

<p>【目的】LHサージ後による顆粒膜細胞の黄体化に伴い発現が増加しprogesterone産生に関与するP450sccをコードするCyp11a1遺伝子発現変化にepigeneticな制御機構が関与するかを検討した。【方法】3週齢雌ラットにPMSGを投与し過排卵モデルを作成，hCG投与前（0 h）と投与後4 h，12 hの顆粒膜細胞を回収し以下の解析を行った。1） Cyp11a1 mRNA発現（定量的RT-PCR），2） ヒストン修飾（ChIP assay），3） DNAメチル化（Bisulfite sequencing法）， 4）クロマチン構造（chromatin accessibility assay）， 5）関与する転写因子の検討（ChIP assay， Luciferase assay）【結果】1）mRNAは0 hに比べ4 h，12 h後に有意に増加した。2）近位promoter領域（–23 bp～–206 bp）では，転写活性に働くヒストン修飾であるH3K4me3は0 hと比べ12 hで有意に増加し，逆に転写抑制に働くヒストン修飾であるH3K9me3とH3K27me3は4 h，12 hともに有意に減少した。3）約–500 bpまでの5 CpG部位のDNAは低メチル化であり，hCG投与後も有意な変化は認めなかった。4）近位promoter領域のクロマチン構造は0 hと比較し4 h，12 hでは有意に弛緩した。5） C/EBPβのCyp11a1近位promoter領域への結合は有意に増加していた。さらに，近位promoter領域のC/EBPβ結合部位は転写活性を有していた。【結論】顆粒膜細胞の黄体化に伴い増加するCyp11a1遺伝子発現変化には，ヒストン修飾の変化によりクロマチン構造が弛緩するというepigeneticな制御が関与している。このクロマチン構造の変化に伴い，転写因子C/EBPβの結合が増加し転写を活性化していると考えられる。</p>

Journal

Details 詳細情報について

  • CRID
    1390282680692940800
  • NII Article ID
    130007024722
  • DOI
    10.14882/jrds.109.0_p-34
  • Text Lang
    ja
  • Data Source
    • JaLC
    • CiNii Articles
  • Abstract License Flag
    Disallowed

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