ガラスビーズを用いたESBLs産生菌の迅速スクリーニング法 A rapid detection method for ESBL-producing Enterobacteriaceae using glass beads

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著者

    • 前田 和樹 MAEDA Kazuki
    • パナソニック健康保険組合松下記念病院臨床検査科 Department of Clinical Laboratory, Matsushita Memorial Hospital
    • 大友 志伸 OTOMO Shinobu
    • パナソニック健康保険組合松下記念病院臨床検査科 Department of Clinical Laboratory, Matsushita Memorial Hospital
    • 林 智弘 HAYASHI Tomohiro
    • パナソニック健康保険組合松下記念病院臨床検査科 Department of Clinical Laboratory, Matsushita Memorial Hospital
    • 志村 敏史 SHIMURA Satoshi
    • 国家公務員共済会組合連合会大手前病院中央検査部 Department of Central Clinical Laboratory, Otemae Hospital
    • 上地 幸平 UECHI Kohei
    • 琉球大学医学部付属病院検査・輸血部 Department of Clinical Laboratory and Blood Transfusion, University Hostipal of the Ryukyus
    • 江後 京子 EGO Kyoko
    • パナソニック健康保険組合松下記念病院臨床検査科 Department of Clinical Laboratory, Matsushita Memorial Hospital

抄録

<p>近年,基質特異性拡張型βラクタマーゼ(Extended-spectrum β-lactamases; ESBLs)産生菌の検出頻度は増加傾向であり,それに伴って迅速検出法が多く考案されている。Nordmannによって報告されたESBL NDP(Nordmann/Dortet/Poirel)testは,迅速かつ正確にESBLs産生菌の検出が可能である。しかし,蛋白抽出試薬として20 mmol/L-トリス-塩酸緩衝液(BPERII Bacterial Protein Extraction Reagent, Thermo Scientific)を用いるため酵素抽出の過程に30分間の時間を要する。そこで,我々はガラスビーズを用いて菌体から酵素を粉砕抽出することでESBLs産生菌を簡便で,迅速かつ安価に検出できるガラスビーズ試験(Glass beads test; GB test)について考案した。今回,GB testの基本性能をNDP testと比較することでESBLs産生菌のスクリーニング検査としての有用性について評価を行った。対象にはESBLsの表現型試験陽性となり,遺伝子型が決定した111株と第3世代セファロスポリン系薬に感受性を示しESBL非産生菌と判定した109株を用いた。GB testとNDP testの判定一致率は100%であった。両検査法の感度,特異度は94.6%,100%であった。さらに,GB testでは酵素抽出時間を30秒に短縮できたことでNDP testと比較して陽性までの検査所要時間が有意に短縮した(<i>p</i> < 0.01)。GB testはESBLs産生菌のスクリーニング法としてNDP testよりも安価でさらに迅速性,簡便性に優れていた。</p>

<p>Recently, the frequency of detection of ESBL-producing Enterobacteriaceae has been increasing, and several rapid detection methods for ESBLs have been developed. The ESBL NDP test, a colorimetric assay described by Nordmann, is very useful because it can be used to detect ESBLs rapidly and accurately. However, in this method, it is necessary to use 20 mmol/L Tris-HCl lysis buffer (BPERII Bacterial Protein Extraction Reagent, Thermo Scientific), which is a commercially available protein extraction reagent, for the extraction of ESBLs within 30 min. In this study, we modified the NDP test to make it more rapid, easy, and inexpensive by using glass beads for extraction (GB test). Then, we evaluated the efficiency of the GB test in comparison with the NDP test as a screening method for ESBLs by comparing the test results using ESBL-producing Enterobacteriaceae strains and other strains. 112 ESBL-producing strains were phenotypically and genotypically identified, and 109 strains that were susceptible to third-generation cephalosporin were tested. The concordance rate between the NDP test and the GB test was 100%. The sensitivity and specificity of both tests were 94.6% and 100%, respectively. Furthermore, with only 30 s needed for enzyme extraction, the GB test significantly shortened the assay time (<i>p</i> < 0.01) in comparison with the NDP test. In conclusion, we confirmed the high efficiency of the GB test as a screening method for ESBLs because it is more rapid, easier, and more cost-effective than the NDP test.</p>

収録刊行物

  • 医学検査

    医学検査 67(5), 727-733, 2018

    一般社団法人 日本臨床衛生検査技師会

各種コード

  • NII論文ID(NAID)
    130007501262
  • 本文言語コード
    JPN
  • ISSN
    0915-8669
  • データ提供元
    J-STAGE 
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