胃粘膜・壁細胞における遺伝子の特異的な転写調節機構 イネンマク カベ サイボウ ニ オケル イデンシ ノ トクイテキ ナ テンシャ チョウセツ キコウ
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Bibliographic Information
- Title
-
胃粘膜・壁細胞における遺伝子の特異的な転写調節機構
- Other Title
-
イネンマク カベ サイボウ ニ オケル イデンシ ノ トクイテキ ナ テンシャ チョウセツ キコウ
- Author
-
西, 毅
- Author(Another name)
-
ニシ, ツヨシ
- University
-
大阪大学
- Types of degree
-
博士 (理学)
- Grant ID
-
甲第5430号
- Degree year
-
1996-03-25
Note and Description
博士論文
Table of Contents
- 目次 / (0002.jp2)
- 発表論文 / (0007.jp2)
- 略号 / (0006.jp2)
- 第1章 序論 / p1 (0008.jp2)
- 第1節 胃底腺を構成する細胞 / p1 (0008.jp2)
- 1.壁細胞 / p1 (0008.jp2)
- 2.主細胞 / p1 (0008.jp2)
- 3.クロム親和細胞(ECL細胞:enterochromaffin-like cells) / p1 (0008.jp2)
- 第2節 胃酸分泌の調節機構 / p3 (0010.jp2)
- 1.酸分泌の促進機構 / p3 (0010.jp2)
- 2.酸分泌の抑制機構 / p3 (0010.jp2)
- 第3節 胃粘膜・壁細胞に発現している遺伝子群 / p5 (0012.jp2)
- 1.胃酸分泌酵素(H⁺/K⁺-ATPase) / p5 (0012.jp2)
- 2.ヒスタミンH₂受容体 / p10 (0017.jp2)
- 3.内因子(intrinsic facter) / p12 (0019.jp2)
- 第3節 遺伝子の組織特異的な転写調節 / p13 (0020.jp2)
- 第4節 本研究の目的 / p16 (0023.jp2)
- 第2章 ラットH⁺/K⁺-ATPase βサブユニット遺伝子5'上流域に特異的に結合する蛋白質と認識配列 / p17 (0024.jp2)
- 第1節 緒言 / p17 (0024.jp2)
- 第2節 材料及び方法 / p20 (0027.jp2)
- 1.試薬 / p20 (0027.jp2)
- 2.ラット胃の核蛋白質の調製 / p20 (0027.jp2)
- 3.ラットの他の臓器からの核蛋白質の調製 / p21 (0028.jp2)
- 4.ブタの胃粘膜からの核蛋白質の調製 / p21 (0028.jp2)
- 5.ラットH⁺/K⁺-ATPase βサブユニット遺伝子の上流領域を持つプラスミドの調製 / p22 (0029.jp2)
- 6.ゲルシフト法に用いたプローブの調製 / p22 (0029.jp2)
- 7.非標識DNA断片の調製 / p24 (0031.jp2)
- 8.ゲルシフト法によるDNA結合蛋白質の検出 / p24 (0031.jp2)
- 9.DNase Iによるフットプリント法に用いたプローブの調製 / p24 (0031.jp2)
- 10.DNase Iによるフットプリント法 / p25 (0032.jp2)
- 第3節 結果 / p27 (0034.jp2)
- 1.ラットH⁺/K⁺-ATPase βサブユニット遺伝子の上流に結合する蛋白質の同定 / p27 (0034.jp2)
- 2.領域Iに存在する認識配列の同定 / p31 (0038.jp2)
- 3.領域II、IIIおよびIVに結合する蛋白質の解析 / p35 (0042.jp2)
- 4.領域IIおよびIVに結合する蛋白質の結合領域の同定 / p37 (0044.jp2)
- 第4節 考察 / p42 (0049.jp2)
- 第3章 壁細胞に特異的に発現している転写調節因子によるラットH⁺/K⁺-ATPase遺伝子の転写活性化 / p46 (0053.jp2)
- 第1節 緒言 / p46 (0053.jp2)
- 第2節 材料及び方法 / p48 (0055.jp2)
- 1.HeLa細胞の培養 / p48 (0055.jp2)
- 2.レポータージーンベクター / p48 (0055.jp2)
- 3.レポータージーン・プラスミドの構築 / p48 (0055.jp2)
- 4.GATA配列への部位特異的な変異導入 / p49 (0056.jp2)
- 5.トランスフェクションに用いる細胞の調製 / p49 (0056.jp2)
- 6.細胞への発現プラスミドの導入 / p54 (0061.jp2)
- 7.ルシフェラーゼ活性の測定 / p54 (0061.jp2)
- 8.βガラクトシダーゼ活性の測定 / p55 (0062.jp2)
- 9.ラットの胃からの核蛋白質の調製およびゲルシフトアッセイ法 / p55 (0062.jp2)
- 10.試薬 / p55 (0062.jp2)
- 第3節 結果 / p56 (0063.jp2)
- 1.GATA-GT1およびGATA-GT2による遺伝子の転写活性化 / p56 (0063.jp2)
- 2.H⁺/K⁺-ATPase αサブユニット遺伝子のGATA-GT1およびGATA-GT2が作用する部位の同定 / p58 (0065.jp2)
- 3.H⁺/K⁺-ATPase βサブユニット遺伝子上流においてGATA-GT1、GATA-GT2が作用する部位の同定 / p61 (0068.jp2)
- 4.GATA配列へのGATA-GT1およびGATA-GT2の結合 / p64 (0071.jp2)
- 第4節 考察 / p67 (0074.jp2)
- 第4章 壁細胞のモデルとしてのMKN45細胞 / p68 (0075.jp2)
- 第1節 緒言 / p68 (0075.jp2)
- 第2節 材料及び方法 / p69 (0076.jp2)
- 1.細胞の培養 / p69 (0076.jp2)
- 2.培養細胞からの全RNAの調製 / p69 (0076.jp2)
- 3.RNAのホルムアミド変性ゲルアガロース電気泳動 / p69 (0076.jp2)
- 4.RNAのブロッティングおよびフィルターの前処理 / p70 (0077.jp2)
- 5.ハイブリダイゼーションおよびフィルターの洗浄 / p70 (0077.jp2)
- 6.ゲノムDNAのアガロースゲル電気泳動 / p71 (0078.jp2)
- 7.ニトロセルロース膜へのブロッティングおよびハイブリダイゼーション / p71 (0078.jp2)
- 8.試薬 / p71 (0078.jp2)
- 第3節 結果 / p72 (0079.jp2)
- 1.MKN45細胞において壁細胞特異的遺伝子が転写されていることの確認 / p72 (0079.jp2)
- 2.MKN45細胞におけるH₂受容体遺伝子の構造 / p72 (0079.jp2)
- 3.MKN45細胞におけるGATA-GT1遺伝子の構造 / p73 (0080.jp2)
- 第4節 考察 / p73 (0080.jp2)
- 第5章 ヒスタミンH₂受容体遺伝子のMKN45細胞での発現調節機構の解析 / p77 (0084.jp2)
- 第1節 緒言 / p77 (0084.jp2)
- 第2節 材料及び方法 / p78 (0085.jp2)
- 1.PCRによるヒスタミンH₂受容体遺伝子のコード領域のクローン化 / p78 (0085.jp2)
- 2.ファージの宿主菌の調製 / p78 (0085.jp2)
- 3.ファージプラークの形成 / p79 (0086.jp2)
- 4.プローブの調製 / p79 (0086.jp2)
- 5.レプリカの調製およびフィルターの前処理 / p79 (0086.jp2)
- 6.ハイブリダイゼーションおよびフィルターの洗浄 / p80 (0087.jp2)
- 7.ファージDNAの大量調整 / p80 (0087.jp2)
- 8.サブクローニング / p81 (0088.jp2)
- 9.ヒスタミンH₂受容体遺伝子の塩基配列の決定 / p81 (0088.jp2)
- 10.Reporter gene assay / p82 (0089.jp2)
- 11.MKN45細胞の核蛋白質の調製 / p84 (0091.jp2)
- 12.ゲルシフト法に用いたプローブの調製 / p84 (0091.jp2)
- 13.核蛋白質とプローブの結合反応の拮抗に用いたDNA断片の調製 / p84 (0091.jp2)
- 14.ゲルシフト法によるDNA結合蛋白質の検出 / p85 (0092.jp2)
- 15.その他の方法および試薬 / p85 (0092.jp2)
- 第3節 結果 / p86 (0093.jp2)
- 1.ヒトのヒスタミンH₂受容体遺伝子のクローニング / p86 (0093.jp2)
- 2.ヒトのヒスタミンH₂受容体遺伝子5'上流領域の塩基配列の解析 / p86 (0093.jp2)
- 3.ヒスタミンH₂受容体遺伝子のプロモーター領域の同定 / p90 (0097.jp2)
- 4.ヒスタミンH₂受容体遺伝子上流に結合するMKN45細胞の核蛋白質 / p92 (0099.jp2)
- 5.DNA断片R1に存在する核蛋白質の認識配列の同定 / p94 (0101.jp2)
- 6.DNA断片R2に存在する核蛋白質の認識配列の同定 / p94 (0101.jp2)
- 7.DNA断片R3に存在する核蛋白質の認識配列の同定 / p94 (0101.jp2)
- 第4節 考察 / p100 (0107.jp2)
- 第6章 総括及び展望 / p102 (0109.jp2)
- 1.本研究で得られた成果 / p102 (0109.jp2)
- 2.今後の研究への展望 / p103 (0110.jp2)
- 引用文献 / p105 (0112.jp2)
- 謝辞 / p115 (0122.jp2)