遺伝子工学的手法によるハイブリッド・マクロライド抗生物質生産放線菌の育種
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著者
書誌事項
- タイトル
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遺伝子工学的手法によるハイブリッド・マクロライド抗生物質生産放線菌の育種
- 著者名
-
有澤, 章
- 著者別名
-
アリサワ, アキラ
- 学位授与大学
-
東京理科大学
- 取得学位
-
博士 (薬学)
- 学位授与番号
-
乙第512号
- 学位授与年月日
-
1996-11-30
注記・抄録
博士論文
目次
- 目次 / (0003.jp2)
- 略語･遺伝子名一覧 / p1 (0008.jp2)
- 緒言 / p3 (0010.jp2)
- 第1章 マクロライド抗生物質4″位アシル化に関与する遺伝子のクローニング / p10 (0017.jp2)
- 序論 / p10 (0017.jp2)
- 第1節 実験材料と方法 / p12 (0019.jp2)
- 1.菌株および培養条件 / p12 (0019.jp2)
- 2.プラスミドおよび試薬類 / p12 (0019.jp2)
- 3.クローニング方法 / p12 (0019.jp2)
- 4.TLCによるマクロライド抗生物質のアシル化の確認 / p13 (0020.jp2)
- 5.遺伝子のサブクローニング / p13 (0020.jp2)
- 6.発現アッセイ / p15 (0022.jp2)
- 7.塩基配列の解析 / p15 (0022.jp2)
- 8.サザンブロット解析 / p16 (0023.jp2)
- 第2節 マクロライド抗生物質の4″位アシル化に関与する遺伝子の取得と限定 / p17 (0024.jp2)
- 1.遺伝子のクローニング / p17 (0024.jp2)
- 2.遺伝子座位の限定 / p18 (0025.jp2)
- 第3節 遺伝子の構造解析 / p21 (0028.jp2)
- 第4節 放線菌におけるacvB1-acyB2相同遺伝子 / p27 (0034.jp2)
- 第5節 考察 / p30 (0037.jp2)
- 第2章 マクロライド抗生物質3-Ο-acyltransferase遺伝子の取得 / p32 (0039.jp2)
- 序論 / p32 (0039.jp2)
- 第1節 実験材料と方法 / p33 (0040.jp2)
- 1.Chromosome walkingによる遺伝子のクローニング / p33 (0040.jp2)
- 2.試薬 / p33 (0040.jp2)
- 3.acyA遺伝子領域の塩基配列の決定 / p34 (0041.jp2)
- 4.acyAのサブクローニング / p34 (0041.jp2)
- 5.0RF-Aのサブクローニング / p34 (0041.jp2)
- 6.0RF-Aの発現 / p35 (0042.jp2)
- 第2節 遺伝子のクローニング / p36 (0043.jp2)
- 第3節 マクロライド3-Ο-acyltransferase遺伝子(acyA)およびその周辺の遺伝子の構造解析 / p38 (0045.jp2)
- 第4節 acvAおよびORF-AのS.lividansにおける発現 / p48 (0055.jp2)
- 第5節 考察 / p51 (0058.jp2)
- 1.Carbomycin生合成遺伝子の構造 / p51 (0058.jp2)
- 2.構造から類推される転写特性 / p52 (0059.jp2)
- 3.0RF-Aについて / p52 (0059.jp2)
- 4.マクロライド抗生物質acyltransferase間の相同性 / p54 (0061.jp2)
- 第3章 マクロライド抗生物質のアシル化を活性化する遺伝子acyB2の機能解析 / p55 (0062.jp2)
- 序論 / p55 (0062.jp2)
- 第1節 実験材料と方法 / p56 (0063.jp2)
- 1.プラスミドの構築 / p56 (0063.jp2)
- 2.発現アッセイ / p56 (0063.jp2)
- 3.ノーザンブロット解析 / p56 (0063.jp2)
- 4.サザンブロット解析 / p57 (0064.jp2)
- 5.微生物変換試験 / p58 (0065.jp2)
- 第2節 変異プラスミドを用いた発現解析 / p59 (0066.jp2)
- 1.酵素活性レベルでの解析 / p59 (0066.jp2)
- 2.acyB1mRNAのノーザンブロット解析 / p59 (0066.jp2)
- 第3節 S.thermotoleransのacyB2変異株および過剰発現株の作出とマクロライドアシル化活性 / p62 (0069.jp2)
- 1.acyB2変異株の作出 / p62 (0069.jp2)
- 2.acyB2変異株および過剰発現株のマクロライドアシル化活性 / p65 (0072.jp2)
- 第4節 acyB1およびacyAの上流領域における共通配列 / p67 (0074.jp2)
- 第5節 放線菌におけるacyB2遺伝子とアシル化マクロライド抗生物質生産能の関係 / p68 (0075.jp2)
- 第6節 考察 / p71 (0078.jp2)
- 第4章 Tylosin生産菌へのアシル化酵素遺伝子の導入と3-Ο-acetyl-4″-Ο-isovaleryltylosin(AIV)の直接発酵生産 / p73 (0080.jp2)
- 序論 / p73 (0080.jp2)
- 第1節 実験材料と方法 / p74 (0081.jp2)
- 1.プラスミドの構築 / p74 (0081.jp2)
- 2.S.fradiaeホスト･ベクター系の確立 / p74 (0081.jp2)
- 3.発酵生産試験 / p74 (0081.jp2)
- 第2節 S.fradiae形質転換株の取得 / p76 (0083.jp2)
- 第3節 3-Ο-acetyltylosin(3-AT)の直接発酵生産 / p77 (0084.jp2)
- 第4節 4″-Ο-acyltylosin類の直接発酵生産 / p80 (0087.jp2)
- 第5節 AIVの直接発酵生産 / p82 (0089.jp2)
- 第6節 考察 / p86 (0093.jp2)
- 1.遺伝子の導入と発現 / p86 (0093.jp2)
- 2.組換え体によるアシル化tylosinの生産について / p86 (0093.jp2)
- 3.アシル化酵素とacylCoAの利用性 / p87 (0094.jp2)
- 4.AIVの選択的生産 / p88 (0095.jp2)
- 総括および結論 / p89 (0096.jp2)
- ABSTRACT(英文) / p93 (0100.jp2)
- 謝辞 / p97 (0104.jp2)
- 参考文献 / p98 (0105.jp2)
