緑色蛍光タンパク質を用いたミトコンドリア輸送解析系の開発 ヒトミトコンドリアインポート受容体Tom20の機能解析への応用 Development of a method of mitochondrial protein import assay with green fluorescent protein : application to analysis of human import receptor Tom20

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著者

    • 矢野, 正人 ヤノ, マサト

書誌事項

タイトル

緑色蛍光タンパク質を用いたミトコンドリア輸送解析系の開発 ヒトミトコンドリアインポート受容体Tom20の機能解析への応用

タイトル別名

Development of a method of mitochondrial protein import assay with green fluorescent protein : application to analysis of human import receptor Tom20

著者名

矢野, 正人

著者別名

ヤノ, マサト

学位授与大学

熊本大学

取得学位

博士 (医学)

学位授与番号

甲第1185号

学位授与年月日

1999-03-25

注記・抄録

博士論文

目次

  1. 目次 / p1 (0004.jp2)
  2. 1)要旨 / p1 (0007.jp2)
  3. 2)発表論文リスト / p3 (0009.jp2)
  4. 3)謝辞 / p4 (0010.jp2)
  5. 4)略語一覧 / p5 (0011.jp2)
  6. 5)研究の背景と目的 / p6 (0012.jp2)
  7. 5)-1 タンパク質のミトコンドリア移行の解析 / p6 (0012.jp2)
  8. 5)-2 ミトコンドリアインポートレセプターTom20の構造 / p23 (0029.jp2)
  9. 5)-3 細胞内輸送のマーカーとしてのgreen fluorescent protien(GFP) / p26 (0032.jp2)
  10. 5)-4 本研究の目的 / p27 (0033.jp2)
  11. 6)実験方法 / p29 (0035.jp2)
  12. 6)-1 プラスミドの構築 / p29 (0035.jp2)
  13. 6)-2 抗体 / p32 (0038.jp2)
  14. 6)-3 培養細胞の培養 / p33 (0039.jp2)
  15. 6)-4 トランスフェクション / p33 (0039.jp2)
  16. 6)-5 蛍光顕微鏡下における細胞内GFPの蛍光の観察 / p34 (0040.jp2)
  17. 6)-6 細胞内GFPおよびhTom20の蛍光染色による局在の観察 / p34 (0040.jp2)
  18. 6)-7 細胞内GFPおよび核の蛍光染色による局在の観察 / p35 (0041.jp2)
  19. 6)-8 マイクロインジェクション法 / p35 (0041.jp2)
  20. 6)-9 電子顕微鏡による形態観察 / p35 (0041.jp2)
  21. 6)-10 ジギトニンを用いた細胞分画 / p36 (0042.jp2)
  22. 6)-11 細胞内GFPの蛍光の定量化 / p36 (0042.jp2)
  23. 6)-12 細胞の膜画分の回収 / p36 (0042.jp2)
  24. 6)-13 免疫ブロット法 / p36 (0042.jp2)
  25. 6)-14 パルス・チェイス法 / p37 (0043.jp2)
  26. 6)-15 GST融合型hTom20の発現と精製 / p37 (0043.jp2)
  27. 6)-16 タンパク質の定量 / p38 (0044.jp2)
  28. 6)-17 in vitro転写とin vitro翻訳 / p38 (0044.jp2)
  29. 6)-18 in vitroにおける前駆体タンパク質のミトコンドリアへの取り込み / p39 (0045.jp2)
  30. 6)-19 前駆体タンパク質のGST融合hTom20への結合能の測定 / p39 (0045.jp2)
  31. 6)-20 プロテアーゼ感受性の測定 / p40 (0046.jp2)
  32. 7)実験結果 / p41 (0047.jp2)
  33. 7)-1 COS-7細胞内におけるミトコンドリア移行型GFPの蛍光の観察 / p41 (0047.jp2)
  34. 7)-2 マイクロインジェクション法によるヒト繊維芽細胞でのpOTC-GFPの発現 / p44 (0050.jp2)
  35. 7)-3 pOTC-GFPのミトコンドリア局在の証明 / p44 (0050.jp2)
  36. 7)-4 GFPおよびpOTC-GFPの免疫ブロット法による細胞内局在の解析 / p46 (0052.jp2)
  37. 7)-5 in vitroにおけるpOTC-GFPおよびpOTCN-GFPのミトコンドリア移行 / p46 (0052.jp2)
  38. 7)-6 CCCPによるpOTC-GFPの移行阻害 / p49 (0055.jp2)
  39. 7)-7 変異型プレ配列を持つpOTC-GFPの細胞内局在 / p49 (0055.jp2)
  40. 7)-8 ヒトTom20の過剰発現によるミトコンドリアの核周辺における凝集 / p52 (0058.jp2)
  41. 7)-9 電子顕微鏡によるヒトTom20過剰発現細胞内の凝集ミトコンドリアの観察 / p52 (0058.jp2)
  42. 7)-10 カルボキシ末端領域を欠いた変異型ヒトTom20の発現 / p55 (0061.jp2)
  43. 7)-11 変異型ヒトTom20過剰発現によるミトコンドリアの形態への効果 / p55 (0061.jp2)
  44. 7)-12 ヒトTom20過剰発現によるpOTC-GFPのミトコンドリア移行の促進 / p58 (0064.jp2)
  45. 7)-13 変異型ヒトTom20過剰発現によるpOTCのミトコンドリア移行への効果 / p58 (0064.jp2)
  46. 7)-14 変異型ヒトTom20過剰発現によるpOTC-GFPのミトコンドリア移行への効果 / p59 (0065.jp2)
  47. 7)-15 GST融合型ヒトTom20の精製 / p62 (0068.jp2)
  48. 7)-16 変異型ヒトTom20存在下での単離ミトコンドリアへの前駆体タンパク質の取り込み / p62 (0068.jp2)
  49. 7)-17 変異型ヒトTom20に対する前駆体タンパク質の結合 / p65 (0071.jp2)
  50. 7)-18 前駆体タンパク質のプロテアーゼ感受性 / p66 (0072.jp2)
  51. 8)考察 / p68 (0074.jp2)
  52. 8)-1 ミトコンドリア移行型GFPを用いた形態変化の観察 / p68 (0074.jp2)
  53. 8)-2 タンパク質のミトコンドリア移行におよぼすヒトTom20の効果 / p69 (0075.jp2)
  54. 9)結語 / p74 (0080.jp2)
  55. 10)参考文献 / p75 (0081.jp2)
8アクセス

各種コード

  • NII論文ID(NAID)
    500000186920
  • NII著者ID(NRID)
    • 8000000187203
  • DOI(NDL)
  • NDL書誌ID
    • 000000351234
  • データ提供元
    • NDL ONLINE
    • NDLデジタルコレクション
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